[发明专利]一种多肽脱盐的方法有效
| 申请号: | 201911380280.2 | 申请日: | 2019-12-27 |
| 公开(公告)号: | CN113049690B | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
| 发明(设计)人: | 姜绪邦;黄嘉成;尹传龙;陶安进;余品香 | 申请(专利权)人: | 翰宇药业(武汉)有限公司;深圳翰宇药业股份有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/38;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20 |
| 代理公司: | 深圳市深佳知识产权代理事务所(普通合伙) 44285 | 代理人: | 夏欢 |
| 地址: | 432200 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 多肽 脱盐 方法 | ||
1.一种多肽脱盐的方法,将多肽样品上样至制备柱,以流动相A1和B冲洗,再以流动相A2和B冲洗,最后以A2和B进行梯度洗脱,收集样品,减压旋蒸,冻干后得脱盐精肽;
其中所述流动相A1为碳酸氢铵;所述流动相A2为纯水或碳酸水溶液;所述流动相B选自乙腈、甲醇、乙醇或异丙醇中的任意一种或几种溶剂的任意比例混合;
在上样前还包括以流动相A1和流动相B平衡制备柱的步骤;所述流动相A1和B的比为90%:10%;
所述制备柱内装填料为反相的C18或C4;
所述多肽样品为利拉鲁肽或索玛鲁肽;
所述多肽样品的上样量为所述制备柱填料质量的1.5%~6.0%;
所述流动相A1和B冲洗时流动相A1与B比为90%:10%,冲洗时间为5~15min;所述流动相A2和B冲洗时流动相A2与B比为90%:10%,冲洗时间为5~15min;
所述流动相A2和B梯度洗脱时流动相B的梯度为10%-60%,洗脱时间为25~35min。
2.根据权利要求1所述的方法,所述多肽样品用流动相A1溶解后上样。
3.根据权利要求1-2任一项所述的方法,所述制备柱内装填料的粒径为5~100μm,填料的孔径为5~100nm。
4.根据权利要求1-2任一项所述的方法所述碳酸氢铵的浓度为5~500mmol/L。
5.根据权利要求3所述的方法所述碳酸氢铵的浓度为5~500mmol/L。
6.根据权利要求1-2或5任一项所述的方法,所述的碳酸水溶液的二氧化碳浓度为5~500mmol/L。
7.根据权利要求3所述的方法,所述的碳酸水溶液的二氧化碳浓度为5~500mmol/L。
8.根据权利要求4所述的方法,所述的碳酸水溶液的二氧化碳浓度为5~500mmol/L。
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