[发明专利]一种抗鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种抗鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体及其应用，属于免疫学技术领域和食品安全分析技术领域。所述抗单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO:C202003的杂交瘤细胞株分泌产生，该抗体效价为1:10⁵，亚型为IgG1，亲和力常数Ka＝5.9×10⁵L/mol。所述的单克隆抗体可用于制备检测生鲜肉及其制品中鸭骨骼肌肌钙蛋白I的酶联免疫试剂盒和胶体金试层析试纸条，以达到快速且灵敏地检测动物源性食品中鸭肉源性成分检测的目的。

技术领域

本发明涉及一种抗鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体、产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞株，以及该抗体在检测鸭骨骼肌肌钙蛋白I上的应用，属于免疫学技术领域和食品安全分析技术领域。

背景技术

在肉类食品中，由于价格、宗教、健康等原因，许多国家制定法规要求食品标签真实明确地标出肉类来源，禁止掺假行为，以保护消费者的利益，但是市场上混淆肉类品种的现象仍然非常普遍，掺假的方式包括掺兑、混入、抽取、假冒等手段，尤其以牛、羊肉制品的掺杂、掺假的行为最为常见，这些掺假行为极大地损害了消费者的利益。鸭、鸡等禽类因饲养周期短、价格低，同时，鸭肉与牛羊肉的纹理高度相似，将大量鸭肉和少量牛羊脂肪、下脚料混合，加工处理后能够达到“以假乱真”的程度，因此，常将鸭肉作为牛羊肉制假的原材料。这种掺假行为损害了消费者的利益，扰乱了市场规则。因此，建立鸭肉源成分的快速鉴别方法至关重要。

目前，肉类食品鉴别的方法主要有感官鉴别、核酸扩增技术、理化方法、免疫学方法。感官方法主要是通过视、嗅、味、触对肉类进行鉴别，主观性较强，不能满足检测要求。核酸扩增技术检测结果准确性较高，是目前国际上检测肉类食品掺假的主流方法，该技术对操作人员的要求较高，所用仪器价格昂贵，不适合基层实验室的应用和现场快速检测，尤其是对于熟肉制品检测有很大不确定性。电子鼻结合气质联用检测掺假肉类有一定的准确性，但是需要检测多种挥发性物质，操作过程和结果处理都比较繁琐。免疫学方法具有灵敏度高、特异性好、成本低、操作方便等特点，适于大批量样品筛选，其中酶联免疫吸附法和胶体金试纸条是最常用的方法。

然而熟肉制品一般都要经过高温、高压处理，在这个过程中许多蛋白都发生了变性，失去了抗原性和水溶性，这就给免疫学方法的建立带来了困难。要想将免疫学法应用于动物源性成分的检测，必须找到一个特异性的热稳定的蛋白质作为标志物抗原，然后制备出针对此抗原的特异性的单克隆抗体。动物骨骼肌中的肌钙蛋白I具有种属专一性，可以作为一种耐热种类标志蛋白，区分不同种属生、熟肉制品的肉种类来源。以鸭骨骼肌肌钙蛋白I(skTnI) 为目标检测物，能实现鸭肉源性成分免疫学检测鉴别技术的建立。因此，抗鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备对于开展鸭肉肉源成分的免疫学检验鉴定工作具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有肉源性检测技术缺陷，提供一种抗鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体，所述单克隆抗体对鸭骨骼肌肌钙蛋白I有特异性，所述抗单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO:C202003的杂交瘤细胞株skTnI-3E7产生。进一步的，本发明将该单克隆抗体应用于检测鸭骨骼肌肌钙蛋白I。

本发明所述技术问题是由以下技术方案实现的。

一种抗鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体，该单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO:C202003 的杂交瘤细胞株产生。该杂交瘤细胞株被命名为杂交瘤细胞株skTnI-3E7，于2019年12月 10日送交中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，保藏单位地址：中国武汉。

上述抗鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体能与鸭骨骼肌肌钙蛋白I特异性结合，效价为 1:10⁵，亚型为IgG1，亲和力常数Ka＝5.9×10⁵L/mol。

上述抗鸭骨骼肌肌钙蛋白I单克隆抗体在用于配制检测生鲜肉及其制品中的鸭骨骼肌肌钙蛋白I的非诊断目的检测产品中的应用。

上述应用，所述非诊断目的检测产品为酶联免疫检测试剂盒或胶体金层析试纸条。