[发明专利]一株在高盐环境下增加木麻黄生物量的内生真菌Z1

说明书

本发明公开了一种能在高盐环境下增加木麻黄生物量的内生真菌Z1，属于微生物领域。该内生真菌Z1的分类命名为：葡萄座腔菌（Botryosphaeria sp.），于2019年11月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；菌种保藏编号为：CGMCC NO.18817。将内生真菌Z1的菌液通过根际土壤浇施或苗木直接接种的方式用于高盐环境下木麻黄苗木的种植，能够增加木麻黄生物量。通过建立木麻黄‑内生真菌共生体系，提高木麻黄在高盐胁迫下的生长，为丰富木本植物内生真菌的菌种信息以及为木麻黄工林经营制造生物菌肥提供数据基础和参考依据。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株在高盐环境下增加木麻黄生物量的内生真菌Z1。

背景技术

盐胁迫严重影响着农作物以及林地植物的生长发育，是世界范围内主要的非生物胁迫。过量的盐分离子，如Na⁺、K⁺、Cl^-等被植物摄取后会使得植物细胞内离子浓度增高，而植物细胞内的各种生物酶只能在较狭窄范围离子浓度才具有活性，如对Na⁺离子和Cl^-离子要求低于50mM，对于K⁺离子而言则是0.1-0.2M。因此，离子浓度的改变影响生物酶活性，从而影响植物的生长。盐胁迫亦能通过影响细胞质膜的组分、透性、运输等一系列的变化，使植物细胞膜功能受损，从而在一定程度上破坏细胞的代谢以及各种生理功能。

短枝木麻黄（Casuarina equisetifolia L.）是世界各国引种最早且人工栽培面积最大的木麻黄科树种，目前也是我国华南和东南沿海最主要的造林树种。现有研究表明，木麻黄本身具有一定的耐盐能力，但其抗盐性的提高有助于发挥更大的生态作用。因此，如何增加木麻黄耐盐能力，提高生态适应性是将来研究的重点。

前人的一系列研究都表明植物内生真菌与宿主的共生体有利于宿主本身应对不利环境，同时还促进植物的生长发育，但这方面的研究大部分集中在禾草科植物，而木本植物内生真菌研究较少。从木麻黄组织中分离鉴定其内生真菌，寻找具有促生效果且具有一定耐盐性的内生真菌，建立木麻黄-内生真菌共生体系，提高木麻黄在高盐胁迫下的生长，可为丰富木本植物内生真菌的菌种信息以及为木麻黄工林经营制造生物菌肥提供数据基础和参考依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一株在高盐环境下增加木麻黄生物量的内生真菌Z1。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种能在高盐环境下促进木麻黄生物量增加的内生真菌Z1，该内生真菌Z1的分类命名为：葡萄座腔菌（Botryosphaeria sp.），已于2019 年 11月20 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国北京，保藏号为CGMCC NO.18817。

该内生真菌Z1在土豆葡萄糖培养基（PDA培养基）上培养时，初期菌落成白色，菌丝纺锤形生长，培养后期菌落颜色开始变深，逐渐呈墨绿色至黑色。上述内生真菌Z1葡萄座腔菌菌株是从木麻黄的种子中分离纯化得到的，其能制备成菌液，通过根际土壤浇施或苗木直接接种的方式用于高盐环境下木麻黄苗木的种植。

所述菌液的制备方法为：将所述内生真菌Z1葡萄座腔菌菌株接入液体培养基中，摇床恒温培养72h后，将所得培养液用无菌水稀释至5.5×10⁶个•L^-1，即得。

所述液体培养基配方为：蛋白胨5.0g，酵母浸出粉2.0g，葡萄糖（C₆H₁₂O₆•H₂O）20.0g，磷酸二氢钾（KH₂PO₄）1.0g，硫酸镁（MgSO₄•7H₂O）0.5g，超纯水1000ml，pH 6.2~6.6。