[发明专利]一种快速分离银耳纯菌丝及银耳母种的制备方法

权利要求书

1.一种银耳母种制备方法，其特征在于：所述银耳母种制备方法步骤如下：

1)分离香灰菌丝：将未纯化的香灰菌丝接种入培养基，将接种入培养基的香灰菌丝放在23-25℃的环境中，等到香灰菌丝颜色转为黑色，挑取黑色部分，接种入新培养基，连续转接得纯香灰菌丝；

2)制备含香灰菌培养物的木屑培养基：将分离纯化的香灰菌丝接种至消毒好的木屑培养基上，23-25℃的环境中培养5-7天，培养获得香灰菌培养物；将香灰菌培养物灭菌，冷却即得含香灰菌培养物的木屑培养基；

3)分离银耳纯菌丝：选择符合种耳标准的银耳子实体作为分离材料，剪取面积为0.9～1.1cm²的耳片，杀灭耳片表面的杂菌；然后吸干小耳片表面水分，接种至所述含香灰菌培养物的木屑培养基中；培养得银耳纯菌丝；

4)交合培养：勾取纯香灰菌丝，接种在银耳纯菌丝旁边培养，在室温22-25℃培养10-15天，此时白毛团分泌黄色或棕红色水珠，再经3-5天培养，待出现白毛团胶质化，出现银耳原基，得银耳母种；

其中，步骤3)中，符合种耳标准的银耳子实体为生长25-30天，朵大7-8cm，无病害的银耳菌袋。

2.根据权利要求1所述的银耳母种制备方法，其特征在于：步骤1)分离香灰菌丝中在栽培银耳的菌袋上挖取一块0.2-0.4cm³带有香灰菌丝的木屑，接入马铃薯葡萄糖琼脂培养基的试管中。

3.根据权利要求1所述的银耳母种制备方法，其特征在于：步骤3)中，剪取的耳片用无菌水冲洗2-3次，并进行灭菌溶液浸泡灭菌。

4.根据权利要求3所述的银耳母种制备方法，其特征在于：所述灭菌溶液为75％的酒精或0.1％升汞溶液，浸泡时间为1.5～2分钟。

5.根据权利要求1所述的银耳母种制备方法，其特征在于：步骤3)中，将浸泡过杀菌溶液的小耳片，立即放入无菌水中，冲洗2-3次，再用无菌纱布吸干水分，接种至消毒好后香灰菌培养物的木屑培养基中；在23-25℃的环境中培养15-20天，待孢子散落至含香灰菌培养物的木屑培养基上，萌发出粗壮、丰满的白毛团，即得银耳纯菌丝。