[发明专利]凡纳滨对虾肌内质网Ca-ATP酶LvSERCA基因及其编码蛋白与应用

说明书

本发明公开了凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺‑ATP酶LvSERCA基因及其编码蛋白与应用。本发明通过试验证明，转化有原核重组表达载体pET‑32a‑LvSERCA的大肠杆菌BL21对盐度具有的一定的耐受性，进一步证明了凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺‑ATP酶LvSERCA基因具有明显的盐度耐受功能，凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺‑ATP酶LvSERCA基因或其编码蛋白可作为筛选盐度抗性家系的分子标记，用于辅助育种选择。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺-ATP酶LvSERCA基因及其编码蛋白与应用。

背景技术

肌内质网Ca²⁺-ATP酶(Sarco/endoplasmic reticulum Ca²⁺-ATPase,SERCA)SERCA位于肌肉细胞的肌质膜网上。其功能主要是在肌肉的舒张时，消耗ATP水解的能量将胞浆中的钙离子运送到肌质膜的管腔中。SERCA在调控胞浆Ca²⁺浓度以及维持内质网官腔内的Ca²⁺浓度中起着关键的作用。在水生动物中，研究得较多的是SERCA，目前已经得到基因克隆的生物包括马氏珠母贝(Pinctada fucata)、紫色球海胆(Strongylocentrotuspurpuratus)、玻璃海鞘(Ciona intestinalis)、青枪鱼(Makaira nigricans)、克氏原螯虾(Procambarus clarkii)、乌鳢(Panulirus argus)以及凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)。

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是全球第一大养殖对虾，是我国对虾养殖的主导品种。因其繁殖期长；广盐性；广温性；可以密养产量高；抗病力较强；耐干性较强；肉质鲜美；个体较大等优点成为养殖最多的品种。近年来凡纳滨对虾已经成为全球第一大养殖对虾，并且也是我国对虾养殖的主导品种。2011年凡纳滨对虾养殖产量约124万吨，占对虾总产量的85％。2011年我国虾类产品的生产总量156万吨，虾类出口30万吨，出口值近21.9亿美元，成为水产品中出口值最高的产品。凡纳滨对虾是广盐性的水产养殖品种,这与该对虾体内存在复杂的离子调节机制有关。肌内质网Ca²⁺-ATP酶是一种细胞内膜结合酶，在凡纳滨对虾的盐度胁迫中表达，我们之前的研究集中在基因水平，分析了LvSERCA的时序表达，然而对于LvSERCA的基因表达和功能研究还未有报道。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺-ATP酶LvSERCA基因及其编码蛋白。

本发明的凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺-ATP酶LvSERCA基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1的第115位-3123位碱基所示，其编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。考虑到密码子的简并性，在不改变氨基酸序列的前提下，对上述编码基因的核苷酸序列进行修改，也属于本发明的保护范围内。

本发明的第二个目的是提供一种含有凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺-ATP酶LvSERCA基因的重组表达载体。

优选，所述的重组表达载体的表达载体为pET-32a。

本发明的第三个目的是提供一种含有上述重组表达载体的宿主细胞。

优选，所述的宿主细胞为大肠杆菌JM109。

本发明的第四个目的是提供上述的凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺-ATP酶LvSERCA基因编码蛋白或其编码基因作为筛选盐度抗性家系的分子标记在辅助育种中的应用。

所述的凡纳滨对虾肌内质网Ca²⁺-ATP酶LvSERCA基因编码蛋白或其编码基因在提高盐耐受性中的应用。