[发明专利]木芙蓉内源细胞分裂素提取剂及其使用方法

权利要求书

1.木芙蓉内源细胞分裂素提取剂的使用方法，木芙蓉内源细胞分裂素提取剂由A剂和B剂按照质量比1～2:1的比例混合后制备而成；其特征在于，包括以下步骤：

a、制备：制备木芙蓉内源细胞分裂素提取剂：将A剂和B剂按照质量比1～2:1的比例混合后制备得到木芙蓉内源细胞分裂素提取剂，10℃下低温保存，待用；

所述A剂是由甘氨酸、邻苯二甲酸、磷酸氢二钠、柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠、乙酸、乙酸钠、盐酸中的至少2种，用重蒸水溶解后配制成pH在2～3的混合水溶液；

所述B剂为甲醇；

b、提取：取木芙蓉组织破碎样品，与a步骤得到的木芙蓉内源细胞分裂素提取剂按照固液比1g:5～10mL混合后，在低于10℃环境下静置4～8h，抽滤，收集滤液Ⅰ，所得滤渣Ⅰ再用步骤a得到的木芙蓉内源细胞分裂素提取剂按照固液比1g:2.5～5mL浸提1～2h，抽滤，收集得到滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ；滤渣Ⅱ再用步骤a得到的木芙蓉内源细胞分裂素提取剂浸提按照固液比1g:1～2.5mL浸提1h，抽滤，收集得到滤液Ⅲ和滤渣Ⅲ；

c、纯化：合并c步骤得到的滤液Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，通过PVPP固液萃取小柱萃取，收集过柱液体，即为木芙蓉组织样品内源细胞分裂素待测液。

2.根据权利要求1所述使用方法，其特征在于，步骤b中所述木芙蓉组织样品为木芙蓉叶、花瓣、花柄、花萼、枝条或根、茎组织或器官中的至少一种。

3.根据权利要求1所述使用方法，其特征在于，将步骤c得到的木芙蓉组织样品内源细胞分裂素待测液采用HPLC或LC-MS检测，得到木芙蓉样品内源细胞分裂素的含量。