[发明专利]一种五味子UPLC指纹图谱的构建方法

说明书

本发明属于药物分析及药物质量控制技术领域，具体涉及一种五味子药材UPLC指纹图谱的构建方法。本发明以五味子醇甲为参照物，所建立的UPLC指纹图谱可以检测到9个共有峰，并识别出五味子醇甲、戈米辛D、五味子醇乙、当归酰基戈米辛H、五味子甲素、五味子乙素等6个共有峰。该方法较普通HPLC法，能大幅度节约检测时间及试剂，可以作为快速评价五味子药材与相关制剂，以及鉴别五味子伪品的方法。

技术领域

本发明属于药物分析及药物质量控制技术领域，具体涉及一种五味子UPLC指纹图谱的构建方法。

背景技术

五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实。习称“北五味子”。始载于《神农本草经》，并列为上品，能收敛固涩，益气生津，补肾宁心。用于久嗽虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗盗汗，津伤口渴，内热消渴，心悸失眠。

近年来五味子价格持续走高，采用南五味子等伪品掺假现象屡禁不绝。现有2015年版《中国药典》收载的质量控制方法仅从性状、鉴别、检查和含量测定对五味子质量加以规定，不能全面的反映药材的质量，因此也难以杜绝上述掺假行为。

超高效液相色谱(UPLC)技术具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点，目前已经成为一种常规的分析方法，并为使用者大幅度节约检测时间及试剂成本。

中药指纹图谱技术，尤其是高效液相指纹图谱技术，能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价，目前已成为控制中药材及制剂的关键技术。

因此，有必要结合以上技术，开发一种快速评价五味子药材与相关制剂，以及鉴别五味子伪品的方法。

发明内容

本发明结合上述技术各自的优点，提供一种五味子UPLC指纹图谱的构建方法。

本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种五味子药材UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)参照物溶液的制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇溶液制成每1ml含五味子醇甲60μg的溶液，即得。

(2)供试品溶液的制备取五味子药材粉末(过三号筛)约0.25g，精密称定，置125ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率1130W，频率37kHz)20分钟，取出，放冷，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

(3)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.30～0.40ml；柱温为25～35℃；检测波长为251nm。五味子醇甲与邻近色谱峰的分离度应大于1.5。

(4)测定法分别精密吸取参照物溶液及供试品溶液各1.5μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得。

(5)对照指纹图谱的建立将35批基地样品图谱生成AIA文件导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行评价，剪切5～30min图谱并生成对照图谱。

(6)评价方法供试品指纹图谱应分别呈现与对照指纹图谱对应的9个共有峰。按中药色谱指纹图谱相似度评价系统，供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算，5分钟后的色谱峰，其相似度不得低于0.90。

所述步骤(3)，其特征在于，色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱型号为Waters HSS T3(2.1×150mm，1.8μm)。

所述步骤(3)，其特征在于，色谱条件与系统适用性试验，流速为每分钟0.30～0.40ml。