[发明专利]一种五味子UPLC指纹图谱的构建方法

权利要求书

1.一种五味子药材UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)参照物溶液的制备 取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇溶液制成每1ml含五味子醇甲60μg的溶液，即得。

(2)供试品溶液的制备 取五味子药材粉末(过三号筛)约0.25g，精密称定，置125ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率1130W，频率37kHz)20分钟，取出，放冷，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

(3)色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.30～0.40ml；柱温为25～35℃；检测波长为251nm。五味子醇甲与邻近色谱峰的分离度应大于1.5。

表1

(4)测定法 分别精密吸取参照物溶液及供试品溶液各1.5μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得。

(5)对照指纹图谱的建立 将35批基地样品图谱生成AIA文件导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行评价，剪切5～30min图谱并生成对照图谱。

(6)评价方法 供试品指纹图谱应分别呈现与对照指纹图谱对应的9个共有峰。按中药色谱指纹图谱相似度评价系统，供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算，5分钟后的色谱峰，其相似度不得低于0.90。

2.根据权利要求1所述的一种五味子药材UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)所述以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱型号为Waters HSS T3(2.1×150mm，1.8μm)。

3.根据权利要求1所述的一种五味子药材UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)所述色谱条件与系统适用性试验，流速为每分钟0.35ml。

4.根据权利要求1所述的一种五味子药材UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)所述色谱条件与系统适用性试验，柱温为30℃。

5.根据权利要求1所述的一种五味子药材UPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤(6)所述，供试品指纹图谱应分别呈现与对照指纹图谱对应的9个共有峰中，识别出6个共有峰，分别为1号峰：五味子醇甲；2号峰：戈米辛D；4号峰：五味子醇乙；5号峰：当归酰基戈米辛H；7号峰：五味子甲素；9号峰：五味子乙素。