[发明专利]一种组织工程皮肤支架材料及制备方法

说明书

本发明提供一种组织工程皮肤支架材料，所述组织工程皮肤支架材料由透明质酸支架和纳米纤维膜组成；所述透明质酸支架由超氧化物歧化酶脂质体负载于透明质酸多孔支架上制得；所述纳米纤维膜由壳聚糖/角蛋白混合溶液制得。本发明还提供组织工程皮肤支架材料的制备方法，采用静电纺丝技术与冷冻干燥技术结合的方法制备的双层皮肤支架材料，解决了皮肤支架材料的生物相容性差和孔径大小不合适的问题以及创面皮肤受有害代谢物影响的问题，且制备方法简单，绿色环保。

技术领域

本发明属于生物支架材料领域，尤其涉及一种组织工程皮肤支架材料及制备方法。

背景技术

皮肤是人体最大的器官，覆盖全身，它使体内各种组织和器官免受物理性、机械性、化学性和病原微生物性的侵袭，因此当遭遇外因侵袭时，皮肤往往会先受到伤害，例如烧伤、烫伤或者疾病等原因造成皮肤损伤，且目前人体皮肤组织损伤大多是通过自体或者异体皮肤移植的方法来治疗，但是这样的治疗方法不仅材料来源受限，还有可能对患者造成二次伤害。而随着医疗科学的发展，组织工程皮肤支架材料为皮肤细胞的体外培养提供了合适的环境，且组织工程皮肤临床应用的成功给皮肤损伤患者带来了希望。

但是目前的材料仍含有部分缺陷，例如：生物相容性差，支架材料孔径不合适的问题，所以，若要做为高质量、高适用性的皮肤替代物，首先就必须是可降解的生物材料，且材料本身对组织没有免疫原性，材料降解的产物对生物组织没有毒性或异常反应；其次，制得的皮肤支架材料应该具有优异的力学性能，有适合细胞生长的孔径且容易诱导毛细血管和血管的生成，且血管和毛细血管长入孔径后不会改变其形状和尺寸；最后，可以抑制细菌的生长，可以释放促进细胞发育的生长因子。

机体在进行新陈代谢的过程中也会释放一些有害物质，正常皮肤中含有的汗腺会促进这些有害物质的排泄，而对于皮肤损伤患者，轻度损伤者汗腺可以慢慢修复，严重者汗腺则不能再生，这就会使机体不能顺利排泄毒素或有害物质，从而使有害物质的量逐渐增加，同时也抑制了皮肤的修复，所以有效的解决这一问题可以进一步促进皮肤支架材料的应用。超氧化物歧化酶是一种普遍存在于动植物与微生物体内的活性物质，可以消除生物体新陈代谢过程中产生的有害物质，如超氧自由基，具有超强的抗氧化、抗炎症功能，可以快速恢复受损细胞组织、使其迅速愈合，但是超氧化物歧化酶进入细胞后的活性半衰期比较短，影响了其作用的发挥，因此解决这一问题也至关重要。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种组织工程皮肤支架材料及制备方法，本发明采用静电纺丝技术与冷冻干燥技术结合的方法制备的双层皮肤支架材料，解决了创面皮肤受有害代谢物影响的问题以及支架材料的生物相容性差和孔径大小不合适的问题。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种组织工程皮肤支架材料，所述组织工程皮肤支架材料由透明质酸支架和纳米纤维膜组成；所述透明质酸支架由超氧化物歧化酶脂质体负载于透明质酸多孔支架上制得；所述纳米纤维膜由壳聚糖/角蛋白溶液制得，所述透明质酸支架的厚度为1.2～5.0mm，孔径大小为60～100μm；所述纳米纤维膜的厚度为0.04～0.8mm，孔径大小为10～40μm；

所述超氧化物歧化酶脂质体的制备方法：将超氧化物歧化酶溶解于水中，并将鞘磷脂、胆固醇的乙醚溶液与超氧化物歧化酶水溶液混合，震荡形成乳剂，之后减压蒸发除去乙醚，得到凝胶态物质，并加入pH7.0的磷酸盐缓冲溶液，震荡使凝胶脱落，继续减压蒸发，得到超氧化物歧化酶脂质体，所述鞘磷脂、胆固醇的比例为1:5～8，所述鞘磷脂、胆固醇的乙醚溶液的浓度为20％，所述超氧化物歧化酶的水溶液的浓度为2％，所述磷脂的乙醚溶液与超氧化物歧化酶水溶液的体积比为1:1～1:1.5，所述脂质体包封率达86％～91％。

一种组织工程皮肤支架材料的制备方法，具体包括以下步骤：

步骤一、将壳聚糖、角蛋白按质量比为2:1～10:1溶于弱酸溶液中，搅拌均匀，得到壳聚糖/角蛋白溶液；将透明质酸溶于超纯水中，得到透明质酸溶液；