[发明专利]一种绵羊多胎性状的ELISA快速检测方法和应用

权利要求书

1.一种绵羊多胎性状的间接ELISA快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取待测绵羊的RNA，反转录后利用引物克隆FecB基因，利用克隆得到的所述FecB基因构建克隆载体；所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～2所示；

(2)将所述克隆载体与真核质粒载体进行连接后，转染Sf9昆虫细胞，进行真核表达，得重组蛋白FecB；

(3)以所述重组蛋白FecB作为抗原免疫小鼠，筛选后得单克隆抗体；

(4)利用所述单克隆抗体进行间接ELISA检测，当显示抗体阳性时，则所述待测绵羊含有多胎主效基因FecB基因，具有产多羔潜力。

2.根据权利要求1所述ELISA快速检测方法，其特征在于，步骤(1)中提取待测绵羊卵巢的RNA。

3.根据权利要求1所述ELISA快速检测方法，其特征在于，步骤(2)所述真核质粒载体的来源包括pcDNA3.1a。

4.根据权利要求1所述ELISA快速检测方法，其特征在于，步骤(3)所述免疫的方法包括进行3次免疫，相邻两次免疫的时间间隔为14d；在进行所述免疫时，第一次免疫时向小鼠注射重组蛋白FecB和完全弗氏佐剂的等体积混合物；第二次免疫时向小鼠注射重组蛋白FecB和不完全弗氏佐剂的等体积混合物；第三次免疫时向小鼠注射重组蛋白FecB和不完全弗氏佐剂的等体积混合物；所述3次免疫时，每次免疫的注射量为100μg/只。

5.权利要求1～4任一项所述间接ELISA快速检测方法在检测绵羊多胎性状中的应用。