[发明专利]一种1,5-脱水葡萄糖醇的唾液无创检测方法及其应用有效
申请号: | 201911207125.0 | 申请日: | 2019-11-29 |
公开(公告)号: | CN110988165B | 公开(公告)日: | 2022-09-27 |
发明(设计)人: | 包玉倩;贾伟;赵爱华;周健;马晓静;王煜非;菅朝慧 | 申请(专利权)人: | 上海市第六人民医院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72 |
代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 郎祺 |
地址: | 200233 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脱水 葡萄糖 唾液 检测 方法 及其 应用 | ||
1.一种1,5-脱水葡萄糖醇的唾液无创检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一,用唾液采集管收集测试个体的唾液样本;
步骤二,将步骤一所采集的唾液样本与乙腈、甲醇溶液混合后预处理;
步骤三,将预处理后的样本进行液相色谱质谱联用分析;
所述液相色谱采用氨基柱或Hilic柱,流动相A是0.05%的氨水溶液,流动相B由含0.05%氨水的乙腈:异丙醇的水溶液组成,其中乙腈:异丙醇:水的体积比为95:5:5;
所述步骤三中的液相色谱联用分析的步骤如下:
(1)梯度洗脱1~2分钟时,保持A相80%,B相20%;
(2)2.5分钟时,A相从80%降低到50%,B相由20%升至50%,并保持到4分钟;
(3)4.1分钟时,A相回到100%,平衡2分钟后重新进样。
2.根据权利要求1所述的1,5-脱水葡萄糖醇的唾液无创检测方法,其特征在于,步骤一中,所述唾液样本的具体采集方法为:采集前至少30分钟刷牙或漱口,保持口腔无刺激时间≥30分钟,咀嚼唾液采集管匹配的棉棒。
3.根据权利要求2所述的1,5-脱水葡萄糖醇的唾液无创检测方法,其特征在于,咀嚼所述唾液采集管匹配的棉棒的时间为1分钟,咀嚼次数为40~50次。
4.根据权利要求1所述的1,5-脱水葡萄糖醇的唾液无创检测方法,其特征在于,步骤二中,所述乙腈、甲醇溶液中乙腈和甲醇的体积比为8:2。
5.根据权利要求1所述的1,5-脱水葡萄糖醇的唾液无创检测方法,其特征在于,步骤二中,所述预处理的操作过程为:混合后的溶液涡旋3-8分钟后,于-20℃冷冻,离心,取上清液待进样测试。
6.根据权利要求1所述的1,5-脱水葡萄糖醇的唾液无创检测方法,其特征在于,所述质谱采用负离子模式,毛细管电压为2.0KV,脱气温度为500℃,脱溶剂气流速为1000L/Hr,锥孔反吹气流流速为50L/Hr,碰撞气流速为0.15mL/分钟。
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