[发明专利]一种花棒的组织培养方法

权利要求书

1.一种花棒的组织培养方法，其特征在于由以下步骤组成：

步骤1：自花棒嫩枝的生长点取外植体；

步骤2：将外植体接种于初代诱导培养基上，诱导分化出丛生芽；初代诱导培养基为B5+NAA 0.1mg/L+6-BA 0.5mg/L+2.4-D 0.1mg/L+GA₃ 0.1 mg/L+CH 0.5g/L；

步骤3：将初代诱导的丛生芽在继代培养基上培养；将继代培养基中长势较好的苗转入生根培养基中，诱导生根；

步骤4：将上述诱导生根后的花棒生根苗进行移栽；移栽后的栽培基质质量比为蛭石1%、沙土50%、羊粪25%、草炭磷酸二铵24%；

所述继代培养基为改良B5+NAA 0.3mg/L+6-BA 1mg/L+CH0.5g/L；

所述改良B5培养基是由B5培养基中的大量元素、微量元素使用量分别减半而得到的，用于花棒继代增殖培养的基本培养基，具体组成如下为：

大量元素：KNO₃ 1250mg/L；MgSO₄·7H₂O 125mg/L；CaCl₂·2H₂O 75mg/L；(NH₄)₂SO₄67mg/L；NaH₂PO₄·H₂O 75mg/L；

微量元素：KI 0.375mg/L；H₃BO₃ 1.5mg/L；MnSO₄·4H₂O 5mg/L；ZnSO₄·7H₂O 1mg/L；Na₂MoO₄·2H₂O 0.125mg/L；CuSO₄·5H₂O 0.0125mg/L；CoCl₂·6H₂O 0.0125mg/L；

铁盐：FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L；Na₂-EDTA 37.3mg/L；

有机物质：肌醇100mg/L；烟酸1mg/L；盐酸吡哆醇(维生素B6)1mg/L；盐酸硫胺素(维生素B1)10mg/L；

所述生根培养基为1/2MS+IAA 0.1mg/L+NAA 0.5mg/L+活性炭1g/L。

2.根据权利要求1所述的花棒组织培养方法，其特征在于：所述的初代诱导培养的条件为培养温度25±1℃，光照强度1500Lx，除白天自然光照外，夜间补光4小时/天。

3.根据权利要求1所述的花棒组织培养方法，其特征在于：所述的继代培养条件为培养温度25±1℃，光照强度2000-3000Lx，除白天自然光照外，夜间补光1小时/天。

4.根据权利要求1所述的花棒组织培养方法，其特征在于：所述的生根培养条件为培养温度25±1℃，除白天自然光照外，夜间不补光。

5.根据权利要求1所述的花棒组织培养方法，其特征在于：步骤1中花棒外植体的灭菌处理过程为采花棒幼嫩枝条上长约0.2-0.5cm的生长点，在超净台上放入无菌容器中，用0.1％的升汞溶液消毒5min，无菌水冲洗2次，每次5min，最后无菌滤纸上吸干水分。