[发明专利]一种花棒的组织培养方法

说明书

本发明提供了一种花棒的组织培养方法，取用花棒幼嫩枝条上的生长点作为外植体，灭菌后经过初代诱导培养、继代培养、生根培养和移栽，系统地研究了花棒的外植体的选择、最佳培养条件、不同阶段的最佳培养基及增殖培养代数。经过实验，得到了花棒的组培中不同阶段的最佳培养基以及培养基组合，最适的培养条件及培养方式，解决了花棒组织培养的玻璃化、缩短育苗时间、栽培中种源较少的问题的难题，为实现花棒的工厂化生产奠定了可靠的基础。本发明操作简便，成本低廉，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于植物生物技术领域，具体而言，涉及一种花棒的组织培养方法，该培养方法特别适用于花棒，包括花棒外植体的选择，生长点组织培养中初代培养基、继代培养基和生根培养基选择，组织培养过程中培养条件的选择等内容。

背景技术

花棒，别名细枝岩黄耆、花子柴、花柴、花秧子、花帽和牛尾梢等，为豆科蝶形花亚科岩黄耆属落叶大灌木，荒漠区典型的固沙先锋植物。分布于中亚干旱半干旱沙漠或沙地，中国的古尔班通古特沙漠、巴丹吉林沙漠、河西走廊沙地、腾格里沙漠、乌兰布和沙漠、库布齐沙漠西部有自然群体，其他沙漠或沙地有人工种植群体及其后代。东部沙地引种花棒，生长良好，甚至优于自然分布区。花棒是优良固沙灌木，有一定的经济效益，在沙区生态文明建设过程中，其苗木需求量很大。

植物组织培养是很重要的生物技术手段。植物的细胞、茎段、叶片等均可以培养。取植物的细胞、器官和组织，置入适当培养基的容器中，在一定的培养条件下，可分化形成完整植株。作为生物技术有力手段的组织培养，日益受到重视，在农林作物的脱毒快繁、突变诱发、细胞工程和基因工程等方面都发挥着重要作用。

组织培养在离体培养条件下，不同植物以及同种植物不同部位的组织细胞对营养要求不同，只有满足了它们各自的特殊要求，才能更好地生长发育。掌握培养基的配制及筛选方法是取得组培成功的关键环节之一。

通过组培扩繁技术提高工厂化花棒育苗数量是解决花棒生态用苗的有效途径。但目前现有技术对花棒的组织培养仍处于摸索阶段，在制定技术方案时可以参考的资料不多，都必须通过试验来逐一解决，关键要解决外植体取材部位、时期，各培养时期培养基的选择，培养条件以及成苗后快繁技术等。花棒的组培扩繁一般包括初代诱导→继代增殖→生根培养三个时期，寻找每个单独环节的培养基较为容易，要实现各代培养基效果的延续比较困难。本发明以开发利用，降低成本为目标，以形成工厂化、产业化生产为目的，提供了花棒组培扩繁的新方案。

发明内容

本发明系统地研究了花棒的外植体的选择、最佳培养条件、不同阶段的最佳培养基及增殖培养代数。

本发明提供了一种花棒的组织培养方法，其特征在于由以下步骤组成：

步骤1：外植体取自花棒嫩枝的生长点；

步骤2：将外植体接种于初代诱导培养基上，诱导分化出丛生芽；

步骤3：将初代诱导的丛生芽在继代培养基上培养；将继代培养基中长势较好的苗转入生根培养基中，诱导生根；

步骤4：将上述诱导生根后的花棒生根苗进行移栽。

所述的初代诱导培养的条件为培养温度25±1℃，光照强度1500Lx，除白天自然光照外，夜间补光4小时/天。

所述的继代培养条件为培养温度25±1℃，光照强度2000-3000Lx，除白天自然光照外，夜间补光1小时/天。

所述的生根培养条件为培养温度25±1℃，除白天自然光照外，夜间不补光。

所述步骤1中花棒外植体的灭菌处理过程为：采花棒幼嫩枝条上长约0.2-0.5cm的生长点，在超净台上放入无菌容器中，用0.1％的升汞溶液消毒5min，无菌水冲洗2次，每次5min，最后无菌滤纸上吸干水分。

所述步骤2和步骤3的接种过程中，将花棒生长点插入培养基。