[发明专利]一种蔬菜中乙磷铝残留量的快速检测方法

权利要求书

1.一种蔬菜中乙磷铝残留量的快速检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：

步骤1：标准溶液的配置

(1)100μg/mL乙磷铝标准储备液：准确称取适量乙磷铝标准物质于10mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，避光4℃保存；

(2)10μg/mL乙磷铝标准中间液：准确吸取100μg/mL乙磷铝标准储备液1mL于10mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度；

(3)乙磷铝基质标准工作液：将10μg/mL乙磷铝标准中间液用空白基质提取液配制成浓度分别为10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL、80ng/mL、100ng/mL的标准溶液备用，用于绘制校准曲线；

步骤2：样品的前处理

(1)将蔬菜样品粉碎，充分混匀，准确称取蔬菜样品置于离心管1中，加入体积比1：1的乙腈-水，使用均质器进行均质，均质后置于离心机进行离心；

(2)离心后，将上清倒入离心管2中，并于残渣中加入体积比1：1的乙腈-水，并进行超声辅助萃取，萃取后置于离心机进行离心，离心后，将上清倒入离心管2中，并用体积比1：1的乙腈-水进行定容；

(3)将Carb柱置于固相萃取装置，用乙腈预淋活化，再用体积比1：1的乙腈-水活化，取上述5mL提取液转移至Carb柱中，再用体积比1：1的乙腈-水洗脱，混匀后取1mL过PTFE针头式滤膜，待测；

(3)样品检测

将处理好的蔬菜样品使用高效液相色谱-质谱仪进行定性和定量分析去计算蔬菜中乙磷铝的含量；

A.取5.0μL待测样品溶液进样，用高效液相色谱-串联质谱仪分析检测，得到待测样品溶液的总离子流图、定量离子色谱图和定性离子对相对丰度色谱图；

B.将步骤1中制备的乙磷铝标准工作液，用高效液相色谱-串联质谱仪分析测定，获得标准溶液的总离子流图、定量离子色谱图和定性离子对相对丰度色谱图；

C.以乙磷铝的保留时间、定性离子对m/z 109/79和定量离子对m/z 109/81进行分析，以定性离子对和定量离子对的色谱峰制作得到乙磷铝标准曲线；

D.根据待测样品溶液中乙磷铝的定性离子对和定量离子对的色谱峰，结合标准曲线，计算得到待测样液中农药残留的浓度Ci，并按以下公式计算得到蔬菜中乙磷铝的含量Xi，含量计算公式为：

公式中：

Xi---试样中乙磷铝残留量，单位为毫克每千克；

Ci---从标准曲线上得到的被测组分的溶液浓度，单位为纳克每毫升；

V---样品溶液定容体积，单位为毫升；

m---样品溶液所代表的试样的质量，单位为克；

f---稀释因子；

所述高效液相色谱-串联质谱仪的液相色谱条件为：色谱柱：1.7μm，2.1×100mm的Waters BEH hilic；进样体积5μL；流动相：0.2％甲酸乙腈+0.2％甲酸水溶液；流速：0.4mL/min；

所述高效液相色谱-串联质谱仪的MS/MS质谱条件为：离子化方式：ESI-；干燥气：干燥气：温度330℃，流量9L/min；鞘气：温度350℃，流量12L/min；雾化气压力：36psi；毛细管电压：4500V，扫描方式：多反应监测；

所述步骤2(1)中，所述蔬菜样品包括：菠菜，芋仔，甘蓝，黄秋葵，小葱；

所述步骤2(1)中，所述蔬菜样品重量/体积比1：1的乙腈-水用量为10g/20mL；所述均质器的转速为8000r/min，均质的时间为1min；所述离心机的转速为3500r/min，所述离心机的离心时间为5min；

所述步骤2(2)中，所述残渣中加入的所述体积比1：1的乙腈-水的添加量为10ml；所述超声辅助萃取的时间为10min；所述离心机的转速为3500r/min，所述离心机的离心时间为5min；所述定容的体积为50ml；

所述步骤2(3)中，所述预淋活化的乙腈用量为3mL；所述活化的体积比1：1的乙腈-水用量为5mL；所述洗脱的体积比1：1的乙腈-水用量为5mL。