[发明专利]用于纳米孔测序的类细胞膜在审
| 申请号: | 201911167070.5 | 申请日: | 2019-11-25 |
| 公开(公告)号: | CN112831395A | 公开(公告)日: | 2021-05-25 |
| 发明(设计)人: | 王照辉;朱囯丽;林建勋;李汉东;章文蔚 | 申请(专利权)人: | 深圳华大生命科学研究院 |
| 主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12Q1/6869 |
| 代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 肖阳 |
| 地址: | 518083 广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 纳米 孔测序 细胞膜 | ||
1.一种用于纳米孔测序的类细胞膜,其特征在于,包括双分子层,所述双分子层包括数个双分子层结构,所述双分子层结构包括亲水端和疏水端,所述亲水端具有碳碳双键端基,所述数个双分子层结构通过分子间作用力相连。
2.一种承载有纳米孔蛋白的用于纳米孔测序的类细胞膜,其特征在于,包括:
交联双分子层,所述交联双分子层由权利要求1所述的类细胞膜的双分子层通过碳碳双键端基自交联形成;
纳米孔蛋白,所述纳米孔蛋白设置于所述交联双分子层空隙内。
3.一种承载有纳米孔蛋白的用于纳米孔测序的类细胞膜,其特征在于,包括:
凝胶结构,至少部分的凝胶结构由凝胶单体与至少部分的权利要求1所述的类细胞膜的双分子层通过碳碳双键端基交联形成;
纳米孔蛋白,所述纳米孔蛋白设置于所述类细胞膜的双分子层空隙内。
4.根据权利要求3所述的类细胞膜,其特征在于,所述凝胶结构进一步由凝胶单体相互交联形成;
任选地,所述交联在紫外光或者化学引发剂的条件下进行的。
5.根据权利要求3所述的类细胞膜,其特征在于,所述凝胶单体包括选自聚乙二醇-二甲基丙烯酸、甲基丙烯酸2-羟乙基酯和N-乙烯基吡咯烷酮的至少之一。
6.根据权利要求2或3所述的类细胞膜,所述纳米孔蛋白为hemolysin蛋白。
7.一种制备权利要求1所述的用于纳米孔测序的类细胞膜的方法,其特征在于,
将具有碳碳双键端基的嵌段共聚物自组装成膜,以便获得所述类细胞膜。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述嵌段共聚物为两嵌段或三嵌段;
任选地,所述成膜是在纳米孔测试装置的纳米孔中进行的;
优选地,所述自组装是在膜片钳技术下进行的;
任选地,所述共聚物是以溶解在正庚烷或者硅油中的形式提供的,所述共聚物的浓度为10mg/mL。
9.一种制备权利要求2~6任一项所述的承载有纳米孔蛋白的用于纳米孔测序的类细胞膜的方法,其特征在于,将纳米孔蛋白设置于权利要求1所述的类细胞膜中。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,将纳米孔蛋白设置于所述的类细胞膜中是通过如下方式实现的:
1)将所述纳米孔蛋白插入所述类细胞膜的双分子层空隙内;2)将插有所述纳米孔蛋白的类细胞膜进行交联处理,所述交联包括所述类细胞膜的双分子层与凝胶单体的交联。
11.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,将纳米孔蛋白设置于所述的类细胞膜中是通过如下方式实现的:
1)将所述类细胞膜进行交联处理,所述交联包括所述类细胞膜的双分子层与凝胶单体的交联;
2)使所述纳米孔蛋白扩散进入交联处理后的类细胞膜中。
12.根据权利要求10或11所述的方法,其特征在于,交联处理前,进一步包括检测电容,电容值为35-85pF,优选为50pF;
任选地,所述纳米孔蛋白为hemolysin蛋白。
13.根据权利要求10或11所述的方法,其特征在于,所述凝胶单体包括选自聚乙二醇-二甲基丙烯酸、甲基丙烯酸2-羟乙基酯和N-乙烯基吡咯烷酮的至少之一。
14.根据权利要10或11所述的方法,其特征在于,所述交联处理是在紫外光下或者化学引发剂下进行的。
15.一种纳米孔测序装置,其特征在于,包括纳米孔,所述纳米孔中设置有权利要求2~6任一项所述的承载有纳米孔蛋白的用于纳米孔测序的类细胞膜或依据权利要求9~14任一项所述的方法制备的承载有纳米孔蛋白的用于纳米孔测序的类细胞膜。
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