[发明专利]模拟体内力-电微环境的动态细胞培养方法和培养装置有效
| 申请号: | 201911162665.1 | 申请日: | 2019-11-25 |
| 公开(公告)号: | CN110904090B | 公开(公告)日: | 2021-10-08 |
| 发明(设计)人: | 毛吉富;李沂蒙;李超婧;焦勇杰;王富军;王璐 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
| 主分类号: | C12N13/00 | 分类号: | C12N13/00;C12N5/071;C12N5/077;C12N5/079;C12M3/00;C12M1/42;C12M1/36;C12M1/34 |
| 代理公司: | 上海统摄知识产权代理事务所(普通合伙) 31303 | 代理人: | 杜亚 |
| 地址: | 201620 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 模拟 体内 环境 动态 细胞培养 方法 培养 装置 | ||
1.模拟体内力-电微环境的动态细胞培养方法,其特征是:在体外将细胞种植在柔性基材上进行培养,并在培养过程中对柔性基材施加循环动态载荷和循环动态电场,以实现模拟体内力-电微环境的动态细胞培养方法;
循环动态载荷和循环动态电场的施加频率为f,循环动态载荷的施加方向为DF,具体为平行或垂直于柔性基材的方向,循环动态电场的施加方向为平行于柔性基材的方向;
循环动态载荷和循环动态电场的起始时间和频率保持一致;
各循环周期内,载荷先随时间逐渐增大,至达到最大值后维持一定时间,再随时间逐渐减小;
柔性基材的形变率与载荷同步变化,先由a线性增大至b,稳定一段时间后,再由b线性减小至a;
b=b1/b0*100%,b1为柔性基材沿DF的最大位移,DF为平行于柔性基材的方向时,b0为柔性基材被夹持的两端之间的初始距离;DF为垂直于柔性基材的方向时,b0为柔性基材未受到循环动态载荷时的初始等效圆直径,等效圆为周长等于柔性基材边长的圆;
各循环周期内,电场的施加时间占总时间的百分比为D,电场强度为E;
所述动态细胞培养方法采用动态细胞培养装置进行,所述动态细胞培养装置包括细胞培养室、用于夹持柔性基材并对柔性基材施加载荷的夹头、用于对柔性基材施加载荷的压头、用于带动夹头沿平行于柔性基材的方向作往复运动的机构I、用于带动压头沿垂直于柔性基材的方向作往复运动的机构II以及用于对柔性基材施加方向平行于柔性基材的电场的电刺激装置,夹头和压头位于细胞培养室内;
电刺激装置主要由通过导线相互连接的信号发生器、数字万用表和金属电极组成,金属电极设置在夹头上,夹头由绝缘材料制成;
夹头的工作面上设有多道沟槽,金属电极设置在中间沟槽内。
2.根据权利要求1所述的模拟体内力-电微环境的动态细胞培养方法,其特征在于,所述体内力-电微环境为人心肌运动时心肌处细胞力-电微环境,f的取值范围为0.5~2Hz,DF为垂直于柔性基材的方向,a为0%,b的取值范围为10%~20%,D的取值范围为0.1%~40.0%,E的取值范围为5~500mV/mm;
或者,所述体内力-电微环境为人成骨过程中成骨处细胞力-电微环境,f的取值范围为2~30Hz,DF为垂直于柔性基材的方向,a为0%,b的取值范围为1%~15%,D的取值范围为5.0%~40.0%,E的取值范围为0.01~10mV/mm;
或者,所述体内力-电微环境为人神经细胞力-电微环境,f的取值范围为0.1~200Hz,DF为平行于柔性基材的方向,a为0%,b的取值范围为1%~5%,D的取值范围为10%~90%,E的取值范围为0.5~100mV/mm;
或者,所述体内力-电微环境为人视网膜细胞力-电微环境,f的取值范围为0.05~1Hz,DF为平行于柔性基材的方向,a为0%,b的取值范围为1%~3%,D的取值范围为10.0%~50.0%,E的取值范围为50~1000mV/mm;
或者,所述体内力-电微环境为人肌腱和韧带运动时肌腱和韧带处细胞力-电微环境,f的取值范围为0.5~2Hz,DF为平行于柔性基材的方向,a为0%,b的取值范围为4%~10%,D的取值范围为40.0%~90.0%,E的取值范围为5~500mV/mm。
3.根据权利要求1或2所述的模拟体内力-电微环境的动态细胞培养方法,其特征在于,机构I主要由驱动电机、可调圆盘、导轨、滑块和拉伸杆组成,可调圆盘的一面与驱动电机的输出轴垂直连接,另一面与导轨连接,导轨与滑块滑动连接,滑块与拉伸杆的一端连接,拉伸杆的另一端与夹头连接,拉伸杆平行于柔性基材。
4.根据权利要求3所述的模拟体内力-电微环境的动态细胞培养方法,其特征在于,滑块与拉伸杆可拆卸连接。
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