[发明专利]一种植物通用型培养基及组织培养

说明书

本发明公开了一种植物通用型培养基及组织培养，属于植物通用型培养基领域。一种植物通用型培养基及组织培养，深入了解各类营养物质的性质与作用，并在培养基基础上，按不同比例组合氨基酸、维生素、脂类、微量元素和常用无血清添加物等成分，构建适用于植物细胞的通用增殖性培养基，可以在本基础培养基的基础上，进行进一步的优化，从而使其能够适应特定细胞，本培养基可以用于对未知的细胞进行基础培养，保证实验的下一步进行。

技术领域

本发明涉及植物通用型培养基领域，尤其涉及一种植物通用型培养基及组织培养。

背景技术

众所周知，细胞是生命体的基本构成单位，也是生命过程中生命体发挥其功能的基本平台。模式细胞则是研究生命科学的理想对象。对于一个多细胞生命体来说，由于细胞彼此之间相互紧密地结合在一起，不易分开，即使通过一些物理、化学或生化技术可以使多细胞体分离成单细胞，但常常会使细胞壁甚至整个细胞受到不良影响，继而影响生命科学研究工作。因此，科学家希望能用模式细来进行生命科学研究，并且认定植物的柱状单细胞——根毛为理想的模式细胞，因根毛系根表皮细胞突起形成的柱状或管状细胞，其内含物便于进行定位、观察和功能的检测与分析工作。此外，植物的根毛还是提高植物对水分和养分的吸收与利用效率的重要保障，也是确保水资源和肥料资源高效利用的重要基础，因此，根毛细胞的培养对植物的生长也具有重要的意义。

现有的一种植物通用型培养基及组织培养，无法对未知细胞进行基础培养，对基本培养基的配方进行优化，使其对植物细胞增殖效果大大增加。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有的无法对未知细胞进行基础培养，对基本培养基的配方进行优化，使其对植物细胞增殖效果大大增加的问题，而提出的一种植物通用型培养基及组织培养。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种植物通用型培养基及组织培养，包括以下步骤：；

S1、配制基础培养基中所需的氨基酸混合物、维生素混合物、微量元素混合物和脂溶性物质；

S2、以α-MEM培养基为起始培养基，称取α-MEM培养基及相应NaHCO₃干粉，用NaHCO₃干粉总体积50％的超纯水搅拌溶解，制得混合溶剂；

S3、向混合溶剂中加入S1中配制的氨基酸混合物、已溶解的L-Cystine和L-Tyrosine，并搅拌均匀；

S4、向混合溶剂中加入S1中的微量元素混合物，并搅拌均匀；

S5、向混合溶剂中加入混有S1中脂溶性物质的葡萄糖干粉，并搅拌均匀；

S6、向混合溶剂中加入S1中的维生素混合物，混匀后分别加入Folic acid与Riboflavin干粉，并搅拌均匀；

S7、调整上述制备的混合培养基浓缩液pH至7.1-7.5，加入Fe(NO₃)₃·9H₂O与FeSO₄·7H₂O定容，制备成培养基浓缩液，之后将培养基浓缩液加入基础培养基中。

优选地，所述S1的氨基酸混合物采用以下步骤制备：称取除L-Cystine和L-Tyrosine之外其余各氨基酸干粉，用占其总体积20％的超纯水搅拌溶解；L-Cystine溶于其总体积1％的超纯水，加1N HCl助溶；L-Tyrosine溶于其总体积1％的超纯水，加1N NaOH助溶。

优选地，所述S1中的维生素混合物采用以下步骤制备：混合除Folic acid与Riboflavin外的其余维生素，用占其总体积5％的超纯水搅拌溶解。