[发明专利]一种基于锌和钼共掺杂钒酸铋阵列的光电化学己烯雌酚传感器的制备方法

权利要求书

1.一种基于锌和钼共掺杂钒酸铋阵列的光电化学己烯雌酚传感器的制备方法，其特征在于锌和钼共掺杂钒酸铋阵列的制备、锰铁氰化合物的制备以及光电化学己烯雌酚传感器的制备，包括以下步骤：

将2.5 cm × 0.8 cm的氧化铟锡导电玻璃依次用丙酮、乙醇和超纯水超声清洗30min，氮气吹干；将锌和钼共掺杂钒酸铋阵列电沉积在干净的氧化铟锡玻璃的导电面上，作为工作电极；继续滴加4 µL 3 mmol/L巯基乙酸到电极表面以固定牛血清蛋白包裹的己烯雌酚，4 ℃冰箱中晾干，超纯水冲洗；继续滴加3 µL 1×10^-2 mol/L 1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和2×10^-3 mol/L N-羟基琥珀酰亚胺的混合溶液以活化羧基，4 ℃冰箱中晾干，超纯水冲洗；继续滴加5 µL 1 µg/mL牛血清蛋白包覆的己烯雌酚滴加电极表面，4 ℃冰箱中晾干，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗；继续滴加5 µL 质量分数为0.1~1.0 % 牛血清白蛋白溶液到修饰电极表面，以封闭电极表面上未结合的非特异性活性位点，4 ℃冰箱中晾干，pH 7.4的磷酸盐冲洗；继续滴加5 µL 0.1 pg/m ~ 20 ng/mL己烯雌酚标准溶液和用锰铁氰化合物及金纳米颗粒复合物标记的己烯雌酚抗体的混合溶液到电极表面，4 ℃冰箱中晾干，pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液冲洗，制得修饰完全的工作电极，即一种检测己烯雌酚的竞争型光电化学免疫传感器；

所述锌和钼共掺杂钒酸铋阵列电沉积在干净的氧化铟锡玻璃的导电面上作为工作电极的具体步骤如下：首先，碘氧铋纳米片电沉积在氧化铟锡玻璃上，具体方法如下：将0.04~ 0.08 mol/L 硝酸铋溶于50 mL 0.4~0.8 mol/L 碘化钾溶液中，用浓硝酸调上述溶液pH至1.4 ~ 1.7，然后将20 mL 0.23 mol/L对苯醌溶液逐滴加入上述溶液中，该溶液作为电沉积的电解液；电沉积过程在以氧化铟锡玻璃为工作电极，铂电极为对电极，银/氯化银电极为参比电极的三电极体系中进行，设置阴极偏压为-0.1 V，沉积时间为3~5 min，得到碘氧铋纳米片；然后，将4 µL含摩尔比分别为0.5~3 % 和3~5 % 的乙酰丙酮钼和乙酰丙酮锌的0.2 mol/L乙酰丙酮钒溶液滴于碘氧铋纳米片上，将上述制备的工作电极煅烧450 ℃ 2 h，用1 mol/L 氢氧化钠溶液将多余五氧化二矾清除，得到锌和钼共掺杂钒酸铋阵列；

所述锰铁氰化合物的制备方法如下所示：0.3~0.8 g 聚乙烯吡咯烷酮溶于10 mL无水乙醇和10 mL蒸馏水的混合溶液中，将0.04 ~ 0.08 g乙酸锰溶于上述溶液，称之为溶液A；将0.06 - 0.1 g的铁氰化钾溶于10 mL乙醇和10 mL蒸馏水的混合溶液中，称之为溶液B；将溶液B缓慢逐滴加入溶液A中，在室温下静置24 h，离心并用蒸馏水和乙醇洗涤数次，在60℃下真空干燥。

2.如权利要求1所述的一种基于锌和钼共掺杂钒酸铋阵列的光电化学己烯雌酚传感器的制备方法，关于金纳米颗粒的制备，步骤如下：

50-55 mL 质量分数为0.01 % 氯金酸溶液，120 ℃油浴中煮沸，2.5-5.0 mL质量分数为1 %的柠檬酸三钠溶液加入上述溶液，搅拌下继续煮沸30 min至溶液变紫红色，制得金纳米颗粒溶液。

3.如权利要求1所述的一种基于锌和钼共掺杂钒酸铋阵列的光电化学己烯雌酚传感器的制备方法，所述锰铁氰化合物及金纳米颗粒复合物的制备，步骤如下：

首先，进行铁氰化合物的氨基化，将18 mg 锰铁氰化合物分散在含0.15 mL 3-氨基丙基三乙氧基硅烷的10 mL乙醇溶液，悬浮液回流90 ℃ 24 h，冷却至室温后上述溶液用乙醇离心洗涤，获得氨基化的铁氰化合物；将10 mL 金纳米颗粒溶液与氨基化铁氰化合物振荡过夜，离心水洗得到锰铁氰化合物及金纳米颗粒复合物。