[发明专利]一种心脏脱细胞基质复合温敏凝胶及其应用

权利要求书

1.一种心脏脱细胞基质复合温敏凝胶，其特征在于：此复合温敏凝胶由壳聚糖温敏凝胶和猪心脏脱细胞基质颗粒(粒径为10-100μm)所构成，其制备方法为：(1)制备壳聚糖溶液，在冰浴及搅拌条件下将β-甘油磷酸钠溶液逐滴加入到壳聚糖溶液中，制备得到低温的壳聚糖温敏凝胶成胶溶液；(2)制备猪心脏脱细胞基质颗粒，粒径为10-100μm；(3)将猪心脏脱细胞基质颗粒加入上述低温的壳聚糖温敏凝胶成胶溶液，颗粒浓度为0.2-6％(w/v，g/ml)，从而得到心脏脱细胞基质复合温敏凝胶成胶溶液；(4)低温的心脏脱细胞基质复合温敏凝胶成胶溶液在处于33-37℃条件时可快速转变为凝胶态。

2.按照权利要求1所述的复合温敏凝胶，其特征在于：

所述壳聚糖的脱乙酰度为95％及以上；

所述壳聚糖的分子量为10000-300000Da，优选200000Da。

3.按照权利要求1所述的复合温敏凝胶，其特征在于：

所述壳聚糖溶液的浓度为1-3％(w/v,g/ml)，优选2％(w/v,g/ml)。

4.按照权利要求1所述的复合温敏凝胶，其特征在于：

所述β-甘油磷酸钠溶液浓度为56％(w/v,g/ml)；

壳聚糖溶液与β-甘油磷酸钠溶液的体积比为35:1-8:1，优选14:1。

5.按照权利要求1所述的复合温敏凝胶，其特征在于：

所述猪心脏脱细胞基质颗粒的制备包括以下两个过程：

猪心脏组织切片制备过程：用37℃含0.25-0.5％(w/v,g/ml)胰蛋白酶及0.02-0.1％(w/v,g/ml)乙二胺四乙酸(EDTA)的磷酸盐缓冲液1000-3000ml灌注经肝素处理的在体猪心脏，经-80℃冻存≥24h后切片为1-4mm厚组织片；

心脏组织片的脱细胞处理过程：心脏组织片和脱细胞过程采用的液体分别以1：15-1：20(w/v,g/ml)用量比例混合，脱细胞过程采用的液体和时间依次为双蒸水24h，含1-3％(v/v)Triton X-100的0.1-0.2％(v/v)氨水溶液96-120h，0.1-0.2％(w/v,g/ml)十二烷基硫酸钠(SDS)溶液24-48h，双蒸水72-96h，真空冷冻干燥；将冷冻干燥后脱细胞组织片置于球磨仪中粉碎成粒径范围为10-100μm的颗粒，经γ射线辐照消毒后冻存于-80℃备用。

6.一种权利要求1-5任一所述心脏脱细胞基质复合温敏凝胶用于受损心肌组织治疗的应用。