[发明专利]用于液态芯片的封闭液、封闭方法及应用

说明书

本发明提供了用于液态芯片的封闭液，所述封闭液包括：磷酸盐缓冲液、蛋白、氨基酸、表面活性剂，和防腐剂。本发明在传统的液态芯片磁珠包被过程中增加了包被抗体磁珠的封闭环节，封闭液中的氨基酸和蛋白可以很好地与磁珠上的空隙结合，从而减少血清蛋白的非特异性结合，从而降低反应的本底，提高反应的灵敏度和精密度。

技术领域

本发明涉及生物检测试剂技术领域，更具体地说，涉及一种用于液态芯片技术的封闭液、封闭方法和应用。

背景技术

液态芯片技术国内又称为“液相悬浮芯片技术”、“多功能流式点阵技术”、“液相芯片分析技术”、“流式荧光检测技术”、“多功能多指标并行分析技术”、“(微球)悬浮阵列技术”等。它有机整合了荧光编码微球技术、激光分析技术、流式细胞技术、高速数字信号处理技术、计算机运算法则等多项科技成果,具有自由组合、高通量、高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、操作简便、在同一平台上即可完成蛋白质和核酸的检测等优点,代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向,被国际业界专家评价为临床诊断的趋势性技术之一。

液态芯片技术的分析系统由羧基化的微球作为反应的基质，该系统能够在一个试管里或微孔板中利用少量的样本，同时进行多种不同的免疫分析。该系统所用的微球为Luminex公司生产的5.6μm塑料小球或6.5μm的磁微球,通过两种或三种不同的红色荧光素分子以不同的比例混合，得到多种不同编码的微球，在反应过程微球结合上带有另一种荧光素的报告分子，通过Luminex公司的多功能流式点阵仪，可以对微球上的两种荧光素进行检测，从而实现同时检测多种目的分子的目标。目前已经有500种不同的微球，可以同时检测多达500种不同的分析物。

目前，传统的磁珠包被方法中，微球通过NHS和EDC活化后，微球通过自身的羧基和蛋白进行结合偶联结合，得到包被有抗体的磁珠，包被好的微球直接保存在含有1％的BSA的磷酸盐缓冲液中，起到封闭和保存的作用，并没有单独进行包被磁珠的封闭，使得在反应过程中，不能完全充分地封闭微球上的空隙,导致反应的本底会较高,从而影响反应的灵敏度，同时还对反应的精密度和准确度和准确度有一定的影响。

发明内容

因此，本发明的目的在于克服现有技术中的缺陷，提供一种用于液态芯片的封闭液、封闭方法及应用。

为实现上述目的，本发明的第一方面提供了一种用于液态芯片的封闭液，其特征在于，所述封闭液包括：磷酸盐缓冲液、蛋白、氨基酸、表面活性剂，防腐剂。根据本发明第一方面的封闭液，其中，所述磷酸盐缓冲液pH为7.0-7.4；

优选地，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.005M-0.05M，优选为0.01-0.05M，最优选为0.01M。

根据本发明第一方面的封闭液，其中，所述蛋白选自以下一种或多种：牛血清白蛋白、酪蛋白、鱼明胶；优选为牛血清白蛋白；

更优选地，所述蛋白的质量百分浓度为1-10％，优选为3％。

根据本发明第一方面的封闭液，其中，所述氨基酸选自以下一种或多种：甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸；优选为甘氨酸；

更优选地，所述氨基酸的质量百分浓度为1-10％，优选为2％。

根据本发明第一方面的封闭液，其中，所述表面活性剂选自以下一种或多种：Tween-20、Triton x-100、BRIJ35；优选为Tween-20；

更优选地，所述表面活性剂的质量百分浓度为0.05-0.1％，优选为0.05％。

根据本发明第一方面的封闭液，其中，所述防腐剂为液体防腐剂和/或固体防腐剂；

优选地，所述液体防腐剂为proclin 300，所述固体防腐剂为硫柳汞钠和/或叠氮钠；