[发明专利]小麦肉桂酸-4-羟基化酶基因及其扩增引物和应用在审
| 申请号： | 201911148125.8 | 申请日： | 2019-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN110699368A | 公开（公告）日： | 2020-01-17 |
| 发明（设计）人： | 陈璨;陈键;卢杰;司红起;马传喜 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/11;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 61223 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 崔瑞迎 |
| 地址： | 230036 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 羟基化酶基因 肉桂酸 小麦 核苷酸序列 扩增 引物 分子辅助育种 基因工程技术 扩增引物 应用 基因 检测 研究 | ||
1.小麦肉桂酸-4-羟基化酶基因，其特征在于，所述基因位于小麦A基因组第三染色体，命名为C4H-3A，基因序列如SEQ ID NO：1所示；或者位于小麦B基因组第三染色体，命名为C4H-3B，基因序列如SEQ ID NO：2所示；或者位于小麦D基因组第三染色体，命名为C4H-3D，基因序列如SEQ ID NO：3所示。
2.用于扩增权利要求1所述小麦肉桂酸-4-羟基化酶基因的引物，其特征在于，所述引物序列如下所示：
C4H-3A基因的引物：
C4H-3A-F：5’-CACAACAACCCAACCGCAAC-3’；
C4H-3A-R：5’-CGTACGTCCGGTACGGGACT-3’；
C4H-3B基因的引物：
C4H-3B-F：5’-ACACAACAGAGCGGTAACAGTTT-3’；
C4H-3B-R：5’-CAATCGTGAAAGTACAACACC-3’；
C4H-3D基因的引物：
C4H-3D-F：5’-AAACAGAACAACCAACCCCAC-3’；
C4H-3D-R：5’-TATCGCAGCATCAGGTTTGG-3’。
3.利用权利要求2所述引物检测小麦肉桂酸-4-羟基化酶基因中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
S1.提取待测小麦的基因组DNA；
S2.以待测小麦的基因组DNA为模板，利用权利要求2所述的引物进行PCR扩增反应；
S3.检测PCR扩增产物。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，PCR扩增体系为：共25μl，其中5×TransStartFastPfu Buffer 5μl，dNTPs 2.5μl，上下游引物各0.5μl，TransStart FastPfu DNAPolynerase0.5μl，模板DNA2μl，ddH2O 14μl。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，PCR程序为：第一步：95℃5min；第二步：95℃45s，Tm 45s，72℃2min30s，35个循环；第三步：72℃10min。
7.如权利要求2所述引物在扩增小麦肉桂酸-4-羟基化酶cDNA中的应用。
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