[发明专利]一种低溶剂用量快速检测牛奶中多环芳烃的方法

权利要求书

1.一种低溶剂用量快速检测牛奶中多环芳烃的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

第一步，采用标准品制作各种多环芳烃的标准曲线；

第二步，利用液液萃取和QuEChERS方法对牛奶中多环芳烃进行提取；

第三步，利用高效脂质定向吸附材料EMR-Lipid进行净化并浓缩；

第四步，净化处理后的样品经气相色谱-三重四级杆串联质谱检测后，参考第一步制得的标准曲线，得到牛奶中各种多环芳烃的含量；

第二步中利用液液萃取和QuEChERS方法对牛奶中多环芳烃进行提取的具体方法如下：

(1)液液萃取：在第一离心管中准确称取牛奶，加入乙腈：丙酮混合溶剂并充分混合，牛奶与乙腈：丙酮混合溶剂的总用量之比为5g:10mL，乙腈：丙酮混合溶剂的体积比为3:2，将第一离心管在涡流振荡器上涡流振荡，后进行超声水浴；

(2)QuEChERS提取：将安捷伦QuEChERS萃取盐包和陶瓷均质子加入第一离心管，安捷伦QuEChERS萃取盐包含6g硫酸镁和1.5g乙酸钠，涡流振荡，而后置于高速冷冻离心机中进行第一次离心，第一次离心速度、温度和时间分别为8000rpm、4℃和10min；

第三步中利用高效脂质定向吸附材料EMR-Lipid进行净化并浓缩的具体方法如下：

将水加入到含有安捷伦QuEChERS dSPE EMR-Lipid的第二离心管中，涡流振荡以活化吸附剂，将第一离心管中的上清液加入到已活化的第二离心管中，涡流振荡，而后置于高速冷冻离心机中进行第二次离心，第二次离心速度、温度和时间分别为8000rpm、4℃和15min；

将第二离心管中的全部上清液加入到含有QuEChERS EMR-Lipid Polish的第三离心管中，第三离心管的QuEChERS EMR-Lipid Polish含1.6g硫酸镁和0.4g氯化钠，快速剧烈震荡并涡流振荡，将第三离心管置于高速冷冻离心机中进行第三次离心，第三次离心速度、温度和时间分别为10000rpm、4℃和20min，而后取上清液4mL转移至已称量的玻璃管中并在20℃氮气流中浓缩至20mg；

所述的气相色谱-三重四级杆串联质谱检测的条件如下：

色谱柱：安捷伦的DB-5MS毛细管色谱柱，色谱柱的规格为30m×0.25mm×0.25μm；

升温程序：80℃保持2min，以20℃/min的速度升至140℃，接着以5℃/min的速度升至310℃；

进样温度、传输线、离子源和四级杆的温度分别为260℃、300℃、230℃和150℃；

进样量：1μL；

载气：氦气；

载气流速：1mL/min，无分流；

电离方式：EI+，70eV；

光电倍增管电压：1506V；

扫描方式：全扫描，33-300amu，采用多重反应检测；

选择离子监测：128、152、154、166、178、202、228、252、276、278。

2.根据权利要求1所述的一种低溶剂用量快速检测牛奶中多环芳烃的方法，其特征在于，第一步中采用标准品制作各种多环芳烃的标准曲线的具体方法如下：

分别以二氯甲烷作为溶剂配制1、2、5、10、30、60、100、200μg/kg共八个水平的多环芳烃标准溶液，分别加入浓度为50μg/kg的氘代苯并[a]芘标准品作为内标物，以标准溶液中多环芳烃的浓度为纵坐标、以经气相色谱-三重四级杆串联质谱检测并经内部标准校正后多环芳烃的响应值，即峰面积为纵坐标，制成各种多环芳烃的标准曲线。

3.根据权利要求1或2所述的一种低溶剂用量快速检测牛奶中多环芳烃的方法，其特征在于，所述的多环芳烃包括萘、苊烯、苊、芴、蒽、菲、荧蒽、芘、苯并[a]蒽、屈、苯并[k]荧蒽、苯并[b]荧蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯并[a,h]蒽或苯并[g,h,i]苝。