[发明专利]提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法有效
申请号: | 201911136323.2 | 申请日: | 2019-11-19 |
公开(公告)号: | CN110804581B | 公开(公告)日: | 2023-02-14 |
发明(设计)人: | 吴宝江;包斯琴;王艳秋;李喜和 | 申请(专利权)人: | 内蒙古大学 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735;C12N5/073;C12N5/10 |
代理公司: | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人: | 赵敬 |
地址: | 010070 内蒙古自治区呼*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提高 like 细胞 小鼠 胚胎 干细胞 诱导 培养液 培养 方法 | ||
1.一种提高2C-like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养方法在小鼠胚胎干细胞诱导培养中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)选用N2B27+2i/LIF培养液培养的小鼠胚胎干细胞,即2i/L-ESCs,在37℃、5%CO2浓度状态下2i/L-ESCs呈边缘整齐的三维穹顶式细胞克隆形态;
每500ml诱导培养液N2B27+2i/LIF组成为:
(2)取步骤(1)得到的1x105个小鼠ESCs转移至诱导培养液N2B27+2i/LIF+RA中,在37℃、5%CO2浓度条件下诱导培养48小时,获得2C-like细胞;
每500ml诱导培养液N2B27+2i/LIF+RA组成为:
所述基础培养液为基础培养液DMEM/F12和基础培养液Neurobasal,二者体积比为1:1;
所述小鼠胚胎干细胞选用2-细胞胚胎基因NELFA和MERVL标记的转基因细胞系。
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