[发明专利]一种细胞剥离方法

权利要求书

1.一种细胞剥离方法，其特征在于，具体步骤如下：

S1、把尼龙毛40至80g放入烧杯中，加入蒸馏水80至160ml，用铝箔盖上烧杯并煮沸15至20min；然后冷却至常温，倒入设有滤纸的漏斗内，把水过滤掉后，再次把尼龙毛放入烧杯中，重复上述步骤5至7次；

S2、把尼龙毛摊在铺有纱布的托盘内，30至45℃温箱并干燥30～40h；

S3、取50ml注射器，并在注射器口配置设有夹头的橡胶管，将尼龙毛装入注射器内，然后将注射器用锡箔纸包好，放入灭菌箱内灭菌；

S4、把注射器固定，往注射器内填入35至40℃的细胞培养液，静置30分钟，然后打开夹头，把细胞培养液放掉，重复上述步骤2至4次；

S5、将待剥离的细胞液用35至40℃的的培养液稀释成4.9×10⁷个细胞/ml至5.1×10⁷个细胞/ml；

S6、将S5中的细胞液倒入注射器内，且细胞液液面没过尼龙毛；用锡箔纸包住注射器，35至40℃温育50min至70min；

S7、然后打开橡胶管的夹头，将细胞液收集于离心管中；然后离心即T淋巴细胞剥离。

2.根据权利要求1所述的一种细胞剥离方法，其特征在于：S1步骤中，把尼龙毛60g放入烧杯中，加入蒸馏水120ml，用铝箔盖上烧杯并煮沸18min；然后冷却至常温，倒入设有滤纸的漏斗内，把水过滤掉后，再次把尼龙毛放入烧杯中，重复上述步骤6次。

3.根据权利要求1所述的一种细胞剥离方法，其特征在于：S2步骤中，把尼龙毛摊在铺有纱布的托盘内，35℃温箱并干燥35h后，使用铝箔将托盘上方盖住。

4.根据权利要求1所述的一种细胞剥离方法，其特征在于：S4步骤中，把注射器固定，往注射器内填入38℃的细胞培养液，静置30分钟，然后打开夹头，把细胞培养液放掉，重复上述步骤3次。

5.根据权利要求1所述的一种细胞剥离方法，其特征在于：S5步骤中，将待剥离的细胞液用38℃的的培养液稀释成5×10⁷个细胞/ml。

6.根据权利要求1所述的一种细胞剥离方法，其特征在于：S6步骤中，将S5中的细胞液倒入注射器内，且细胞液液面没过尼龙毛；用锡箔纸包住注射器，38℃温育60min。。

7.根据权利要求1所述的一种细胞剥离方法，其特征在于：S7步骤中，打开橡胶管的夹头2滴/分钟的速度，将细胞液收集于离心管中。