[发明专利]一种功能性发酵海带多糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种功能性发酵海带多糖制备方法，属于生物技术和保健食品领域，所述的制备方法是以特定分子量组成的海带多糖为基质，利用益生菌进行微生物固态发酵，发酵结束后进行干燥，即可获得功能性发酵海带多糖制品。本发明提高了海带多糖的生物活性，使其成为具有降血脂、清除自由基、提高免疫力和改善肠道菌群功能的复合活性多糖，可应用于功能性保健食品的开发。

技术领域

本发明属于生物技术和保健食品领域，涉及一种健康营养保健食品的研制及其应用，具体涉及一种功能性海带多糖的制备方法。

背景技术

近年来，随着社会经济发展与人们生活水平提升，心血管疾病发病率呈逐年上升趋势，已严重威胁人类健康。动脉粥样硬化是心血管系统疾病中最常见的疾病之一，也是心血管疾病共同的病理基础。积极预防和控制动脉粥样硬化是预防心血管疾病、降低疾病发病率的重要手段。

海带是我国东南沿海常见的经济型养殖海藻，具有药食同源性，在我国多部古代医学典籍中均有记载其药学功效。现代科学研究表明，多糖是海带活性主要的功效成分之一，具有抗氧化、降血脂、抗凝血、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤等生物学活性。海带多糖主要由三种多糖组成：褐藻胶、褐藻糖胶和褐藻淀粉。褐藻胶，主要存在于海带的细胞壁和细胞间质，由α-1,4-L-古罗糖醛酸和β-1,4-D-甘露糖醛酸组成，是三种海带多糖中含量最高的多糖。褐藻淀粉，主要存在于海带细胞质中，由1,3或1,6-β-D-葡聚糖构成，其含量约占1％。褐藻糖胶，主要存在于海带细胞间质，主要由岩藻糖、甘露糖、半乳糖、木糖等单糖组成，其含量一般在0.3-1.5％。目前，海带多糖的提取工艺已有众多研究报道，一般采用溶剂提取粗多糖，再经过物理破碎，化学处理或生物酶降解等方法进行细胞壁、膜成分分解，以上方法都可以提取并获得一定组成的多糖。

已有发明专利申请公开了一种海带多糖及其提取分离方法(公开号:CN105777930A)，采用高温高压水提法提取海带多糖粗提物，多糖粗提物经 DEAE-阴离子交换层析和Sephacryl S-300凝胶层析二步分离后得到海带纯化多糖PS-3-1，其分子量为132KDa。所得海带纯化多糖具有自由基清除活性，其对羟自由基和超氧阴离子清除率均大于70％，可开发为自由基清除剂药物。但利用海带多糖活性组分进行生物发酵，提高海带多糖生物活性，进而开发成具有降血脂、清除自由基、提高免疫力和改善肠道菌群功能的功能性保健食品的方法尚无研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有营养保健功能的发酵海带多糖制剂，使其成为具有降血脂、清除自由基、提高免疫力和改善肠道菌群功能的复合活性多糖，进而开发成一种含有益生菌的功能性保健食品。

本发明技术方案如下：

先采用溶剂提取法制备海带多糖粗组分，再经大孔树脂分离洗脱后收集特定组分的海带多糖，并以该多糖组成为主要固态发酵基质，接种特定微生物进行生物发酵，最后干燥制成特定的剂型。

其中所述特定分子量组成的海带多糖制备工艺如下，将海带干粉碎，粗粉用蒸馏水进行溶解，料水比为1:15～1:20，搅拌均匀后置于高压灭菌锅内，压力为0.1-0.15Ma，温度100～105℃，水解时间30～60min。提取液浓缩后采用乙醇沉淀，使乙醇终浓度为70～75％，沉淀1～2小时，其沉淀物为海带多糖粗组分。海带多糖粗组分进一步采用SephadexG-100凝胶层析柱进行层析分离，采用pH 7.0的PBS缓冲液洗脱收集第二峰组分，浓缩后进行喷雾干燥即得特定分子量的海带多糖活性组分干粉，海带多糖组分的分子量范围为100～200 KDa。

其中所述发酵海带多糖固态发酵基质的成分及配比为：海带多糖活性组分70～80％，葡萄糖3～5％、麸皮1～20％、蛋白胨3～5％，氯化钠0.1～1.0％，磷酸氢二钾0.1～0.5％，硫酸铵0.1～0.5％，上述百分比均表示重量比。