[发明专利]自主异花授粉及自主单性结实番茄的培育方法在审
| 申请号： | 201911117060.0 | 申请日： | 2019-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN110894500A | 公开（公告）日： | 2020-03-20 |
| 发明（设计）人： | 邓帅;王喜萍;张从省;公小君 | 申请（专利权）人： | 潍坊兴旺生物种业有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;A01H1/02;A01H5/04;A01H6/82 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 261235 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 自主 授粉 单性 结实 番茄 培育 方法 | ||
1.番茄自主单性结实系的培育方法，其包括：
（1）构建敲除番茄染色体上3个靶位点的载体，其中所述靶位点是核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1、2和3所示的核酸；
（2）将步骤（1）获得的载体导入番茄外植体；和，
（3）培养步骤（2）获得的外植体，筛选出敲除阳性的株系。
2.番茄自主异花授粉自主单性结实系的培育方法，其包括：
（1）构建敲除番茄染色体上靶位点的载体，其中所述靶位点包括核苷酸序列如SEQ IDNO：6所示的核酸和核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示的核酸；
（2）将步骤（1）获得的载体导入番茄外植体；和，
（3）培养步骤（2）获得的外植体，筛选出敲除阳性的株系。
3.权利要求2所述的培育方法，其中，所述靶位点还包括核苷酸序列分别如SEQ ID NO：7和8所示的核酸。
4.权利要求2所述的培育方法，其中，核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示的靶位点纯合敲除的株系是自主异花授粉自主单性结实系，核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示的靶位点杂合敲除的株系是自主异花授粉自主单性结实系的恢复系。
5.权利要求1或2所述的培育方法，其中，所述敲除的方式是通过CRISPR/Cas9技术敲除。
6.权利要求1或2所述的培育方法，其中，所述导入的方式是农杆菌侵染。
7.权利要求1或2所述的培育方法，其中，所述筛选的方式是通过PCR来筛选。
8.权利要求3所述的方法培育的番茄自主异花授粉自主单性结实系的繁育方法，其包括，将所述番茄自主异花授粉自主单性结实系与其恢复系杂交，以子代植株的茎秆颜色进行筛选。
9.权利要求8所述的繁育方法，其中，子代植株的茎秆颜色为绿色的是番茄自主异花授粉自主单性结实系，子代植株的茎秆颜色为紫色的是番茄自主异花授粉自主单性结实系的恢复系。
10.核苷酸序列如SEQ ID NO：1、2、3、6、7或8所示的核酸在培育番茄自主单性结实系或番茄自主异花授粉自主单性结实系中的应用。
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