[发明专利]CTLA-4 Aptamer靶向共负载PD-1 siRNA纳米颗粒及其制备和应用

说明书

本发明公开了一种CTLA‑4 Aptamer靶向共负载PD‑1 siRNA纳米颗粒及其制备和应用，该纳米颗粒包括纳米载体和负载于其上的活性成分，所述活性成分包括CTLA‑4 Aptamer和PD‑1 siRNA。本发明的纳米颗粒将CTLA‑4 Aptamer和PD‑1 siRNA共负载于纳米递送体系，通过纳米颗粒表层的CTLA‑4 Aptamer靶向介导，靶向CTLA‑4配体细胞，同时可与负载的PD‑1siRNA联合作用于同一免疫细胞，尤其是Treg细胞，促进协同免疫反应的产生；而且，该纳米颗粒与单独的CTLA‑4 Aptamer与PD‑1 siRNA的联合应用相比，能够大大提高CTLA‑4 Aptamer与PD‑1 siRNA的联合免疫治疗效果。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种CTLA-4 Aptamer靶向共负载 PD-1siRNA纳米颗粒及其制备和应用。

背景技术

免疫检查点抑制剂推进了癌症免疫疗法的发展，在临床得到了广泛的应用，尤其是PD-1单抗和CTLA-4单抗，两者的联用也在黑色素瘤、肾细胞癌和非小细胞肺癌的临床试验中取得了显著疗效。

PD-1/PD-L1途径通过抑制T细胞促进Tregs(调节性T细胞)的发育和功能行使，从而维持具有潜在致病性的自身反应性T细胞和Tregs之间的动态平衡。CTLA-4在T细胞上表达并且对T细胞活化具有抑制作用。它是CD28的同源物，和抗原递呈细胞(APCs)上的CD80、CD86结合并下调T细胞活化，增加Treg(调节性T细胞)活性。

小干扰RNA(siRNA)是一段长为20-25个碱基对的双链RNA。利用siRNA 干扰目的蛋白的表达已被用于研究治疗各种疾病，PD-1 siRNA也被证实可发挥PD-1免疫检查点抑制剂的作用。

核酸适配体(Aptamer，缩写为Apt)是一段长为10nt至100nt的具有一定空间结构的寡核苷酸，适配体具有类似于抗体的极高的亲和力和特异性，但与抗体相比，其制备过程更加简单，时间短，批次间差异小，免疫原性和毒性更小。CTLA-4 Aptamer已被证实能够有效靶向表达CTLA-4的免疫细胞，与 CTLA-4结合，刺激效应T细胞活化增殖，抑制肿瘤生长。

目前的研究显示，PD-1单抗和CTLA-4单抗的双免疫阻断作用机制主要是两者分别作用于免疫调节的启动及效应阶段，能够发挥协同作用。将两者同时或先后给药产生协同作用的原因有两种解释，一种解释是这两种药物同时作用于一个细胞，引起级联反应放大抗肿瘤效应，另一种解释是两者趋向于靶向不同类型的免疫细胞，协同增强抗肿瘤免疫反应。

但是目前尚未有将两种免疫检查点抑制剂共同负载在一个药物纳米载体上并研究其作用于同一个免疫细胞产生的抗肿瘤免疫效应的报道。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明的一个目的是提供一种CTLA-4 Aptamer 靶向共负载PD-1 siRNA纳米颗粒。

为了实现上述目的，本发明采用了如下的技术方案：

一种CTLA-4 Aptamer靶向共负载PD-1 siRNA纳米颗粒，包括纳米载体和负载于其上的活性成分，所述活性成分包括CTLA-4 Aptamer和PD-1 siRNA。

在本发明的一些实施方案中，所述CTLA-4 Aptamer通过吸附或化学键连接分布于所述纳米载体的表层。

在本发明的一些实施方案中，所述PD-1 siRNA通过包载分布于所述纳米载体的内部和/或通过吸附分布于所述纳米载体的表层。