[发明专利]一种乙肝相关肝细胞癌的预后检测试剂盒

说明书

本发明属于生物医学和临床诊断技术领域，公开了一种乙肝相关肝细胞癌的预后检测试剂盒及其在临床医学中的应用。本发明检测试剂盒中包含载脂蛋白A4、载脂蛋白C3和载脂蛋白C4的检测试剂。具体而言，包含与所述各亚型载脂蛋白相关的免疫吸附剂、酶结合物、酶反应底物和标准品。本发明试剂盒可用于血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、组织匀浆等样本的检测。本发明试剂盒由于采用了多种载脂蛋白联合效应分析的策略，使得其对肝细胞癌的预后预测能力得到了显著增强，经验证，本发明试剂盒在预测肝细胞癌的总生存时间和无瘤生存方面灵敏准确、特异性强，另外，本发明试剂盒还具有操作简便、样本易获得、检测耗时短等优点。

技术领域

本发明属于生物医学和临床诊断技术领域，尤其涉及一种乙肝相关肝细胞癌的预后检测试剂盒及其在临床医学中的应用。

背景技术

肝癌被列为全球第六大最常见癌症(Alejandro Forner,Llovet,&Bruix,2012)，列所致死亡人数最多的癌症第三位。其中，肝细胞癌(HCC)约占原发性肝癌的75-80％。HCC发生的危险因素包括：慢性乙型或丙型肝炎病毒(HBV,HCV)感染、2型糖尿病、重度饮酒、黄曲霉毒素污染、肥胖、非酒精性脂肪肝和吸烟。如今，HCC患者的治疗主要依赖于手术切除、局部区域和全身治疗等。尽管HCC有多种替代治疗方法，但其5年生存率仍然相当低，仅不足10％，因此，对其进行及时的早期诊断和准确的预后评估显得尤为重要。

载脂蛋白是一种能够结合和运输血脂到机体各组织进行代谢及利用的功能性蛋白质，根据其不同的表型分类，载脂蛋白(APO)家族由APOA、APOB、APOC、APOD、APOE、APOF、APOH、APOL、APOM和APOO亚家族成员组成。其中，载脂蛋白A和载脂蛋白C亚家族分别由载脂蛋白A1、载脂蛋白A2、载脂蛋白A4和载脂蛋白A5以及载脂蛋白C1、载脂蛋白C2、载脂蛋白C3和载脂蛋白C4组成。研究发现，载脂蛋白家族成员具有多种生物活性且与多种疾病的发生发展具有关联，如载脂蛋白A1/载脂蛋白B血清比率的变化有可能反映出动脉粥样硬化和抗动脉粥样硬化之间的动态平衡，该比率被称为脑血管和心血管疾病发病风险的良好预测因子(Min,Lu,Yong,&Gang,2011)；载脂蛋白C3与甘油三酯水平密切相关(Luo,Su,Yi,Yang,&Peng,2018)；载脂蛋白A1-75G/A和-83C/T基因型与乳腺癌易感性和淋巴结转移相关(Hamrita,2011)等。

然而，目前有关于APO家族的研究，主要集中在心血管、脑血管和动脉粥样硬化等方面，针对它们与肿瘤(尤其是乙肝相关肝细胞癌)关系的研究报道极少，我们的研究目的旨在确认载脂蛋白和HCC预后之间的关系，并在此基础上开发一种乙肝相关肝细胞癌的预后检测试剂盒。据我们所知，目前尚未见到基于载脂蛋白的诊断技术应用于乙肝相关肝细胞癌的预后评估的相关报道，也没有类似的检测技术或检测试剂盒正式应用于临床实践中。

发明内容

为了对乙肝相关肝细胞癌(HCC)进行准确的预后评估，并为载脂蛋白探寻新的临床用途，我们通过大量的筛选验证实验，研制获得了一种新的乙肝相关肝细胞癌的预后检测试剂盒。

本发明乙肝相关肝细胞癌的预后检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒中包含载脂蛋白A4、载脂蛋白C3和载脂蛋白C4的检测试剂。

进一步地，所述检测试剂盒中还可包含载脂蛋白A1、载脂蛋白A2、载脂蛋白C1和载脂蛋白C2的检测试剂。

进一步地，上述检测试剂盒中包含与所述各亚型载脂蛋白相关的免疫吸附剂、酶结合物、酶反应底物和标准品。

进一步地，上述免疫吸附剂为固相的抗原或抗体，所述酶结合物为酶标记的抗原或抗体，所述酶反应底物为与所述酶结合物中的酶发生特异性结合反应的反应底物。

优选地，上述检测试剂盒中还可包含下述组分中的至少一种：封闭液、中性磷酸缓冲液、洗涤液、稀释液、显色剂、终止液、硫代硫酸钠饱和溶液、质控血清。