[发明专利]游离前列腺特异性抗原检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，其包含：

第一试剂，

第二试剂；和

其中，

所述第一试剂包含：

-按w/v计0.01％至3％表面活性剂、

-按w/v计0.05至0.2％稳定剂、

-按w/v计0.05至0.2％防腐剂、和

-10mM至500mM缓冲液pH 6至8；

所述第二试剂包含：

-包被有第一抗体的第一纳米微球、

-包被有第二抗体的第二纳米微球、和

-10mM至500mM缓冲液pH 6至8；

所述第一抗体为抗人fPSA单克隆抗体或其抗原结合片段；

所述第二抗体为抗复合物的单域抗体，且所述第二抗体不单独结合人fPSA；所述复合物是所述第一抗体和人fPSA形成的复合物；

所述第二抗体通过间隔臂分子连接至所述第二纳米微球；

所述第一试剂和第二试剂中的缓冲液独立地选自以下的一种或组合：磷酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、硼酸缓冲液、醋酸盐缓冲液、氯化铵缓冲液；

所述的表面活性剂选自以下的一种或组合：脂肪醇聚氧乙烯醚、吐温20、Brij；

所述间隔臂分子选自以下任一项：戊二醛、血清白蛋白、甲状腺球蛋白、铜蓝蛋白、卵蛋白、多聚赖氨酸；

所述第一纳米微球的平均粒径为400nm至500nm

所述第二纳米微球的平均粒径为400nm至500nm。

2.根据权利要求1所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，其中：

所述的单克隆抗体源自：鼠、兔、禽、羊、重组抗体；

所述的抗原结合片段选自：Fab、Fab'、F(ab')2、scFv、Fv、dsFv、单域抗体。

3.根据权利要求1所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，所述脂肪醇聚氧乙烯醚选自以下的一种或组合：AEO7、AEO9、AEO3。

4.根据权利要求1所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，其还包含质控品和/或校准品；

所述校准品包含已知浓度的人fPSA；

所述质控品包含已知浓度的人fPSA。

5.根据权利要求1所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，所述第一试剂和第二试剂中缓冲液的浓度独立地为20mM、30mM、40mM、50mM、60mM、70mM、80mM、90mM、或100mM。

6.根据权利要求1所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，所述第一试剂和第二试剂中缓冲液的pH独立地为7.0至7.5。

7.根据权利要求1所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，其中：

所述的纳米微球是由选自以下中的一种或更多种聚合而成：聚苯乙烯、丙烯酸、丙烯酸酯。

8.根据权利要求1所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，所述第一纳米微球的平均粒径为450nm；所述第二纳米微球的平均粒径为450nm。

9.根据权利要求1所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，所述第一试剂还包含以下的一种或组合：

0.1至0.5M盐离子、

按w/v计0.5至2％PEG。

10.根据权利要求4所述的游离前列腺特异性抗原的检测试剂盒，所述校准品包含：0ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、2ng/ml、5ng/ml或10ng/ml fPSA、缓冲液、稳定剂、防腐剂。