[发明专利]制备生物表面活性剂的方法

权利要求书

1.一种制备生物表面活性剂的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)对铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)CGMCC No1.10452进行活化培养，得到种子液；

(2)将所述种子液接种于发酵培养基，进行发酵培养，获得发酵液，从所述发酵液中提取所述生物表面活性剂；

其中所述发酵培养基包括以下浓度的组分：

20～50g/L的甘油；

3～10g/L的酵母膏；

5～10g/L的磷酸二氢盐；

1～5g/L的磷酸一氢盐；

0.04～0.1g/L的CaCl₂；

0.02～0.1g/L的FeSO₄；以及

0.10～0.5g/L的MgSO₄·7H₂O。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养在发酵罐中进行，所述发酵罐的通气量为1.5～2.5L/min，发酵温度为30～37℃。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵罐的装液量为所述发酵罐容积的40％～80％。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述从所述发酵液中提取所述生物表面活性剂的步骤包括以下步骤：

利用第一膜分离组件(M1)对所述发酵液进行抽滤，去除所述发酵液中的所述铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)，获得无菌发酵液；

利用第二膜分离组件(M2)对所述无菌发酵液进行抽滤，分离所述无菌发酵液中的水相与油相，获得含有所述生物表面活性剂的油相。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)在发酵系统中进行，所述发酵系统包括：发酵罐(C1)、第一接收池(C2)、第二接收池(C3)、所述第一膜分离组件(M1)、所述第二膜分离组件(M2)、第一真空抽滤泵(P1)、第二真空抽滤泵(P2)、取样管路(X1)、以及分离管路(X2)；

所述发酵罐(C1)与所述第一接收池(C2)通过所述取样管路(X1)连通；

所述第一真空抽滤泵(P1)设置在所述取样管路(X1)上；

所述第一接收池(C2)与所述第二接收池(C3)通过所述分离管路(X2)连通；

所述第二真空抽滤泵(P2)设置在所述分离管路(X2)上；

所述第一膜分离组件(M1)位于所述发酵罐(C1)的内部，并且与所述取样管路(X1)的进液端连通；

所述第二膜分离组件(M2)位于所述第一接收池(C2)的内部，并且与所述分离管路(X2)的进液端连通；

所述步骤(2)包括以下步骤：

将所述种子液接种于所述发酵罐(C1)内的发酵培养基，进行发酵培养，获得发酵液；

开启所述第一真空抽滤泵(P1)，通过所述第一膜分离组件(M1)对所述发酵液进行过滤，所述发酵液中的所述铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)滞留在所述发酵罐(C1)内，其余部分经过所述第一膜分离组件(M1)和所述取样管路(X1)导入到所述第一接收池(C2)内，获得所述无菌发酵液；

开启所述第二真空抽滤泵(P2)，通过所述第二膜分离组件(M2)对所述无菌发酵液进行过滤，所述无菌发酵液中的水相滞留在所述第一接收池(C2)内，油相经过所述第二膜分离组件(M2)和所述分离管路(X2)导入到所述第二接收池(C3)，从而获得所述含有所述生物表面活性剂的油相。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述第一膜分离组件(M1)中的滤膜为亲水性膜；

所述第二膜分离组件(M2)中的滤膜为疏水性膜。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述亲水性膜选自纤维素膜、聚醚砜膜和尼龙膜中的至少一种；

所述疏水性膜选自陶瓷超滤膜、聚丙烯膜和聚四氟乙烯膜中的至少一种。