[发明专利]鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法和鲜鱼腥草制剂的检测方法

权利要求书

1.一种鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

对照品溶液的制备：取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、金丝桃苷和槲皮苷对照品，加溶剂溶解，得对照品溶液；

鲜鱼腥草标准汤剂的冻干粉制备：取鲜鱼腥草饮片，加水提取，固液分离，所得提取液浓缩并冷冻干燥，得鲜鱼腥草标准汤剂的冻干粉；

供试品溶液的制备：取所述鲜鱼腥草标准汤剂的冻干粉，加入体积分数为65~75%的乙醇水溶液进行提取，提取液过滤，取续滤液，得供试品溶液；

将所述对照品溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱仪中进行检测，所述超高效液相色谱仪采用的流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.05~0.15%的磷酸水溶液，洗脱方式为梯度洗脱；

所述梯度洗脱包括如下程序：

0~7min，流动相A的体积百分比由5%上升至11%；

7~10min，流动相A的体积百分比由11%上升至11.5%；

10~13min，流动相A的体积百分比由11.5%上升至20%；

13~20min，流动相A的体积百分比由20%上升至25%；

所述超高效液相色谱仪采用的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

所述超高效液相色谱仪采用的检测波长为程序波长：0~13分钟为326nm，13~20分钟为254nm。

2.根据权利要求1所述的鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱仪的条件包括：

流速：0.25~0.35 mL/min；柱温：25~35℃。

3.根据权利要求2所述的鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述流速为0.3 mL/min；所述柱温为30℃。

4.根据权利要求1所述的鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备中，所述提取的方法为超声提取，超声功率为200~300 W、频率为30~50 kHZ；所述提取的时间为25~35 min。

5.根据权利要求1所述的鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述鲜鱼腥草标准汤剂的冻干粉制备中，所述加水提取的方法为两次煎煮：一煎加8~14倍量水，武火加热至沸腾后，文火煎煮20~30min；二煎加6~12倍量水，武火加热至沸腾后，文火煎煮15~25min。

6.根据权利要求1所述的鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述固液分离采用的筛网目数为200~400目；及/或，所述浓缩的温度为40~70℃。

7.根据权利要求1所述的鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述冷冻干燥的程序包括：预冻温度-50~-30ºC，预冻时间1~2小时；升华干燥温度-45ºC~0ºC，升华干燥时间40~80小时，真空度0.1~0.3mbar；解析干燥温度为10ºC~30ºC，解析干燥时间3~10小时，真空度0mbar。

8.根据权利要求1-7任一项所述的鲜鱼腥草标准汤剂的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述特征图谱包含7个共有峰，7个共有峰中包括新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、金丝桃苷和槲皮苷的特征峰。