[发明专利]一种厌氧氨氧化菌干粉菌剂制备及复壮的方法

权利要求书

1.一种厌氧氨氧化菌干粉菌剂制备方法，其特征在于，以药剂聚乙二醇、甘露醇、生物素、乙二胺四乙酸和羟胺五种药剂的水溶液作为保护剂，保护剂溶液的加入量为厌氧氨氧化菌沉淀物质量的1-2倍；保护剂溶液，以100mL的去离子水计，含有聚乙二醇0.8-1.0g、甘露醇0.5-0.7g、生物素0.2-0.4g、乙二胺四乙酸0.6-0.8g、羟胺0.4-0.6g；

所述制备方法包括以下步骤：

（1）取待保藏的厌氧氨氧化菌，离心，弃去上清液，获得厌氧氨氧化菌沉淀物；

（2）将上述获得的厌氧氨氧化菌沉淀物用硝氮浓度为10-20mg/L的硝酸钾溶液浸泡10-15min，离心，去上清液，得到经硝酸钾处理后的厌氧氨氧化菌沉淀物；

（3）将上述经硝酸钾处理后的厌氧氨氧化菌沉淀物与保护剂溶液混合，并在涡旋器上振荡均匀，之后用氮气进行吹脱，去除混合物中的溶解氧；

（4）将步骤（3）中得到的混合物冷冻干燥得厌氧氨氧化菌干粉菌剂，将厌氧氨氧化菌干粉菌剂进行抽真空包装，避光保存备用。

2.根据权利要求1所述的干粉菌剂制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述离心的操作条件为：转速8000-10000r/min，时间为10-15min。

3.根据权利要求1所述的干粉菌剂制备方法，其特征在于，步骤（1）中离心处理过程中向厌氧氨氧化菌中加入pH为7.0-7.2的0.1-0.3mol/L磷酸盐缓冲溶液。

4.根据权利要求1所述的干粉菌剂制备方法，其特征在于，步骤（4）中所述的冷冻干燥为置于真空冷冻干燥机中，抽真空至压力至5-10 Pa，前10-12h温度设为-40～-30℃，后10-12h温度为-70～-50℃，烘干。

5.根据权利要求1所述的干粉菌剂制备方法，其特征在于，步骤（4）中所述的冷冻干燥为置于真空冷冻干燥机中，抽真空至压力至5-10 Pa，前10-12h温度设为-38～-28℃，后10-12h温度为-65～-55℃，烘干。

6.根据权利要求1所述的干粉菌剂制备方法，其特征在于，步骤（4）中冷冻干燥得到厌氧氨氧化菌干粉菌剂含水率为15-20％。

7.根据权利要求1所述的干粉菌剂制备方法，其特征在于，步骤（4）中避光保存的温度为3-5℃。

8.一种权利要求1~7任一项所述制备方法制备的厌氧氨氧化干粉菌剂复壮的方法，其特征在于，包括：

（1）将干粉菌剂接种于厌氧反应器中，接种浓度约为2000-3000mg/L，投加废水，静置；

（2）搅拌，反应器温度控制在30-35℃，装置正常进出水，运行7-25天，将厌氧氨氧化干粉菌剂复壮。

9.根据权利要求8所述的厌氧氨氧化干粉菌剂复壮的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的废水含有氨氮和亚硝酸盐氮，比例为1:（1-2），总氮为80-120mg/L。

10.根据权利要求8所述的厌氧氨氧化干粉菌剂复壮的方法，其特征在于，步骤（1）中所述废水中含有CaCl₂·2H₂O、EDTA、硫酸亚铁、磷酸二氢钾和MgSO₄·7H₂O金属盐中的一种或多种。

11.根据权利要求10所述的厌氧氨氧化干粉菌剂复壮的方法，其特征在于，其中CaCl₂·2H₂O含量为0.1-0.5g/L、EDTA含量为0.005-0.01g/L、硫酸亚铁含量为0.005-0.01g/L、磷酸二氢钾含量为0.001-0.05g/L，MgSO₄·7H₂O含量为0.1-0.3g/L。

12.根据权利要求10所述的厌氧氨氧化干粉菌剂复壮的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的静置为静置20-30小时。