[发明专利]一种控制细胞黏附和脱离的细胞培养材料及制备方法

权利要求书

1.一种控制细胞黏附和脱离的细胞培养材料的制备方法，其特征在于使用2-正丙基-2-噁唑啉为单体，聚合得到聚（2-正丙基-2-噁唑啉），通过酸催化水解部分侧链，并使用丁二酸单甲酯酰氯官能化，碱性水溶液水解酯键，酸化得到羧酸官能团，随后接枝到胺化二氧化硅玻片表面；该制备方法包括如下步骤：

步骤一：氮气氛围下，将2-正丙基-2-噁唑啉加入到无水乙腈中，再加入三氟甲磺酸甲酯作为引发剂，引发剂与2-正丙基-2-噁唑啉的摩尔比为1：100~1：300，在50-80℃下反应进行3~7天，使用0.1~0.5wt%氢氧化钠的甲醇溶液终止，旋干溶剂，产物聚（2-正丙基-2-噁唑啉）溶于水，透析3-5天，冻干得到白色固体；

步骤二：聚（2-正丙基-2-噁唑啉）以0.1~0.5g/ml溶于甲醇中，加入浓盐酸，在80~100℃下反应30~90min，随后旋干，加入氢氧化钠将pH调至碱性，再次旋干，将剩余物溶于二氯甲烷并过滤，随后向乙醚中沉淀，产物为聚（乙烯亚胺-co-2-正丙基-2-噁唑啉），真空烘干；

步骤三：将所述聚（乙烯亚胺-co-2-正丙基-2-噁唑啉）溶于二氯甲烷 ，加入丁二酸单甲酯酰氯，随后滴加三乙胺，反应3~5小时，过滤并向乙醚中沉淀，所得固体烘干，溶于稀的氢氧化钠溶液，水解一段时间，加入盐酸pH调至酸性，在水中透析3~5天，冻干得到聚[（2-正丙基-2-噁唑啉）—COOH] 白色固体；

步骤四：将所述聚[（2-正丙基-2-噁唑啉）—COOH] 溶解于二氯甲烷中，并加入N,N'-二环己基碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺，反应数小时后过滤，并将3-氨丙基三乙氧基硅烷修饰过的二氧化硅玻片浸入滤液中，常温过夜即可。

2.如权利要求1所述的控制细胞黏附和脱离的细胞培养材料的制备方法，其特征在于步骤一中制备的聚（2-正丙基-2-噁唑啉）的数均分子量在10000~35000之间。

3.如权利要求1所述的控制细胞黏附和脱离的细胞培养材料的制备方法，其特征在于步骤二中酸化水解时聚（2-正丙基-2-噁唑啉）的浓度为0.1~0.5g/ml，水解时长30~90min。

4.如权利要求1所述的控制细胞黏附和脱离的细胞培养材料的制备方法，其特征在于步骤三中使用与聚（乙烯亚胺-co-2-正丙基-2-噁唑啉）摩尔比为1：100~1：20的丁二酸单甲酯酰氯对侧链进行官能化。

5.如权利要求1所述的控制细胞黏附和脱离的细胞培养材料的制备方法，其特征在于步骤四中使用3-氨丙基三乙氧基硅烷官能化的二氧化硅玻片作为接枝基底。