[发明专利]可定向诱导的、抗凋亡的多能干细胞及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种可定向诱导的、抗凋亡的多能干细胞，其特征在于，所述多能干细胞导入有Tet-On系统和抗凋亡基因Bcl。

2.如权利要求1所述一种可定向诱导的、抗凋亡的多能干细胞，其特征在于，所述Tet-On系统包括Ngn2、Isl1、Lhx3基因和TRE，所述Tet-On系统通过TRE调控Ngn2、Isl1和Lhx3基因表达。

3.一种可定向诱导的、抗凋亡的多能干细胞的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括使用基因修饰技术将Tet-On系统和抗凋亡基因Bcl转入多能干细胞，得到所述可定向诱导的、抗凋亡的多能干细胞。

4.如权利要求3所述多能干细胞的制备方法，其特征在于，所述Tet-On系统包括Ngn2、Isl1、Lhx3基因和TRE，所述Tet-On系统通过TRE调控Ngn2、Isl1和Lhx3基因表达。

5.如权利要求3所述多能干细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将Tet-On系统和抗凋亡基因Bcl克隆到载体上，将所述载体与hiPSC进行共转染，通过抗性筛选得到转入了Tet-On系统和抗凋亡基因Bcl的多能干细胞。

6.如权利要求5所述多能干细胞的制备方法，其特征在于，所述共转染操作使用包括两种PB载体和转座酶，其质量比为2:2:1。

7.如权利要求5所述多能干细胞的制备方法，其特征在于，所述抗性筛选的抗性基因为BSD抗性基因，且抗凋亡载体里面含有GFP标记，BSD筛选后的GFP阳性细胞为转染了两种载体的细胞。

8.一种运动神经元的制备方法，其特征在于，加入四环素类药物诱导如权利要求1或2所述多能干细胞定向诱导分化为运动神经元，所述四环素类药物包括四环素和四环素衍生物中的至少一种。

9.一种治疗神经退行性疾病药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包括如权利要求1或2所述可定向诱导的、抗凋亡的多能干细胞。

10.如权利要求9所述的一种治疗神经退行性疾病药物制剂，其特征在于，所述药物制剂可在体内诱导分化为运动神经元，所述神经退行性疾病为运动神经元损伤性疾病。