[发明专利]一种氢核磁定量分析技术测定NMN绝对含量的方法

说明书

本发明涉及氢核磁定量分析技术测定NMN绝对含量的方法，可有效解决对产品中NMN绝对含量的测定，确保产品质量的问题，方法是，测定NMN和内标物对苯二酚在溶剂氘代水中的定量峰；设置核磁共振波谱仪的参数，将内标物对苯二酚溶于氘代水中，得内标物对苯二酚溶液；取内标物对苯二酚溶液，加入NMN，待完全溶解后，上机测试，得到图谱后，进行相位和基线调整；测定含有NMN的样品和内标物对苯二酚的定量目标峰的相对积分面积，根据内标物的质量，计算NMN的质量，然后计算NMN的纯度，即得NMN的绝对含量。本发明方法简单，成本低，测试准确，在测量含量的同时鉴别化合物的结构，测试样品无需对比品，操作简单，测试时间短，测试不会破坏样品的结构，样品可回收。

技术领域

本发明涉及质量检测，特别是一种氢核磁定量分析技术测定NMN绝对含量的方法。

背景技术

NMN即β-烟酰胺单核苷酸(Nicotinamide mononucleotide，NMN)，是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+，辅酶I)的生物合成前体。NAD+是维生素PP(烟酸和烟酰胺)的衍生物，它在细胞的新陈代谢反应中起着至关重要的作用，如糖酵解，糖异生，三羧酸循环和呼吸等细胞生理过程。人体的衰老过程伴随着体内NAD+含量的减少，服用NMN可作为人体NAD+合成的有效补救途径，可以延缓细胞衰老过程。临床实验发现NMN具有治疗帕金森病、阿尔兹海默症、改善听力等方面的功效。NMN的功效引起了广泛关注，目前市场上出现了很多以NMN为主要成分的保健品、药物和化妆品。由于NMN原料和产品价格高昂，在工业合成和产品生产过程中，高效准确的NMN含量检测方法对其质量控制具有重要意义。

核磁共振技术在解析化合物的结构的同时，也能定量测定化合物的含量，即定量核磁共振技术(quantitative nuclear magnetic resonance，qNMR)。定量核磁共振技术是一种基于核磁共振原理的定量分析方法，原理是不同于化学环境的氢原子共振峰面积，只与其原子数有关。该方法收录《美国药典》和《欧洲药典》，2010版《中国药典》也增加此方法。该方法快捷、不破坏样品，使用已知含量的普通化学物质替代待测组分的高纯度对照品为参比，相比于高效液相法、气质及液质联用等定量技术具有不受杂质响应值影响，能同时给出定性的结构信息和定量分析结果，不依赖与被测物的高纯度标准品的优势，定量成本大大降低。利用定量核磁共振氢谱法，选择内标物代替使用目标测试物的标准品做外标的高效液相色谱法的研究具有重要意义。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种氢核磁定量分析技术测定NMN绝对含量的方法，可有效解决对产品中NMN绝对含量的测定，确保产品质量的问题。

本发明解决的技术方案是，一种氢核磁定量分析技术测定NMN绝对含量的方法，包括以下步骤：

(1)、测定NMN和内标物对苯二酚在溶剂氘代水中的定量峰；

(2)、设置核磁共振波谱仪的参数，包括脉冲宽度、驰豫延迟时间、采样温度、采样次数，将内标物对苯二酚溶于氘代水(重水)中，得内标物对苯二酚溶液；取内标物对苯二酚溶液，加入NMN，待完全溶解后，上机测试，得到图谱后，进行相位和基线调整；

(3)、测定含有NMN的样品和内标物对苯二酚的定量目标峰的相对积分面积，积分面积是将定量目标峰值积分5次，积分数值除去最大值和最小值，取中间三个值的平均值，得到积分面积；

(4)、根据内标物的质量，计算NMN的质量，然后计算NMN的纯度，即得NMN的绝对含量。

本发明方法简单，成本低，测试准确，可在测量含量的同时鉴别化合物的结构，测试样品无需对比品，操作简单，测试时间短，测试不会破坏样品的结构，样品还可以回收，节约资源，可以直接进行定量核磁测试，避免前处理对样品和测试结果的影响，有很强的实用价值，易于推广应用，经济和社会效益巨大。

附图说明