[发明专利]具有强杀菌效果的杂合抗菌蛋白及其应用

说明书

本发明公开了一种具有强杀菌效果的杂合抗菌蛋白及其应用，所述的具有强杀菌效果的杂合抗菌蛋白，包括如SEQ ID NO 1所示的氨基酸序列，命名为AB469，以及由所述的AB469的催化域相似的序列组成的杂合蛋白、由所述的AB469的结合域相似的序列组成的杂合蛋白或由AB469的催化域和结合域位置互换组成的杂合蛋白。本发明的杂合抗菌蛋白，利用大肠杆菌或者酵母菌等进行表达，纯化后获得高纯度的杂合抗菌蛋白；该蛋白能快速裂解鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、沙门氏菌、大肠杆菌等革兰氏阴性菌。由该抗菌蛋白制成的抗菌制剂可用于预防和治疗细菌感染，可制成抗菌制剂用于预防和治疗细菌感染，以及医疗器械和医疗场所的杀菌等。

技术领域

本发明涉及杂合抗菌蛋白。

技术背景

抗生素已经广泛应用于医疗卫生、农业养殖领域，在治疗感染性疾病以及保障公共卫生安全中，发挥了重要作用。然而，随着抗生素大量使用，细菌对抗生素的耐药性问题日益严重，在世界范围内已经造成临床治疗上的困难及病死率增高，严重威胁人类健康。

多重耐药菌主要包括鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肠杆菌、肠球菌和金黄色葡萄球菌等，其中革兰氏阴性菌(G^-菌)占比最大，尤其是鲍曼不动杆菌近几年耐药性越来越严重(Mezzatesta M L,D’Andrea M M,Migliavacca R,et al.Epidemiologicalcharacterization and distribution of carbapenem-resistant Acinetobacterbaumannii clinical isolates in Italy[J].Clinical Microbiology and Infection,2012,18(2):160-166.Durante-Mangoni E,Zarrilli R.Global spread of drug-resistant Acinetobacter baumannii:molecular epidemiology and management ofantimicrobial resistance[J].Future microbiology,2011,6(4):407-422.)。世界卫生组织(WHO)列出12种重点耐药性细菌中，耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肠杆菌类最为严重，迫切需要开发新型抗菌药物，尤其是与传统抗生素作用模式不同的抗菌药物。

传统抗生素具有广谱抗菌特点，对正常菌群也有同样作用。抗生素大量的使用过程中正常菌群也会产生耐药，耐药基因在正常菌群和致病菌之间相互传播，显著增加了耐药菌的产生的几率。肽聚糖是细菌细胞壁主要成分，是由糖链、肽链和肽键桥交联而成的三维网状结构，它维持着细胞壁的机械强度，保护细菌不受外部因素的影响。肽聚糖水解酶(peptidoglycan hydrolases)，是一类能特异性裂解细菌细胞壁肽聚糖的蛋白质(VollmerW,Joris B,Charlier P,et al.Bacterial peptidoglycan(murein)hydrolases[J].FEMSmicrobiology reviews,2008,32(2):259-286.)，主要包括噬菌体裂解酶、细菌素和细菌自溶酶等。比如金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysK、模仿葡萄球菌表达的细菌素溶葡萄球菌酶和肺炎链球菌自溶酶LytA。肽聚糖水解酶一般由两种结构域组成，即负责水解肽聚糖的催化结构域(催化域)和负责特异性靶向细菌细胞壁的结构域(结合域)。