[发明专利]突变的肝细胞生长因子基因及其应用

权利要求书

1.一种突变的肝细胞生长因子(HGF)基因的内含子4或其片段，其中，所述突变的内含子4在下述位点上包含突变：对应于SEQ ID NO：1的第3815位、第4774位和第4876位的位点；并且，所述片段包含所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第1至246位和第3686至4926位的核苷酸片段；

优选地，所述片段还包含，所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第2686位至第3685位核苷酸片段；

优选地，所述片段还包含，用于连接核苷酸片段的接头序列；优选地，所述接头序列的长度为1-5个，5-10个，10-20个，20-30个，30-40个，40-50个，50-60个，60-70个，70-80个，80-90个，90-100个，100-200个，或200-500个核苷酸；例如，所述接头序列如SEQ ID NO:13所示。

2.权利要求1的突变的内含子4或其片段，其中，所述片段包含或者由下述组成：

(1)所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第1至246位的第一核苷酸片段，所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第3686至4926位的第二核苷酸片段，以及任选地，位于所述两个核苷酸片段之间的接头序列；

(2)所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第1至246位的第一核苷酸片段，和所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第3686至4926位的第二核苷酸片段，其中，所述第一核苷酸片段的3'端直接连接至所述第二核苷酸片段的5'端；

(3)所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第1至246位的第一核苷酸片段，和所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第3686至4926位的第二核苷酸片段，其中，所述第一核苷酸片段的3'端通过接头序列连接至所述第二核苷酸片段的5'端；

(4)所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第1至246位的第一核苷酸片段，所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第2686至4926位的第二核苷酸片段，以及任选地，位于所述两个核苷酸片段之间的接头序列；

(5)所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第1至246位的第一核苷酸片段，和所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第2686至4926位的第二核苷酸片段，其中，所述第一核苷酸片段的3'端直接连接至所述第二核苷酸片段的5'端；或

(6)所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第1至246位的第一核苷酸片段，和所述突变的内含子4中对应于SEQ ID NO：1的第2686至4926位的第二核苷酸片段，其中，所述第一核苷酸片段的3'端通过接头序列连接至所述第二核苷酸片段的5'端。

3.权利要求1或2的突变的内含子4或其片段，其中，所述突变的内含子4包含选自下列的突变：在对应于SEQ ID NO：1的第3815位的位置上的核苷酸被突变为腺嘌呤核苷酸；在对应于SEQ ID NO：1的第4774位的位置上的核苷酸被突变为鸟嘌呤核苷酸；在对应于SEQ IDNO：1的第4876位的位置上的核苷酸被突变为鸟嘌呤核苷酸；以及，其任何组合；

优选地，所述突变的内含子4包含下述突变：在对应于SEQ ID NO：1的第3815位的位置上的核苷酸被突变为腺嘌呤核苷酸；在对应于SEQ ID NO：1的第4774位的位置上的核苷酸被突变为鸟嘌呤核苷酸；以及，在对应于SEQ ID NO：1的第4876位的位置上的核苷酸被突变为鸟嘌呤核苷酸。

4.权利要求1-3任一项的突变的内含子4或其片段，所述肝细胞生长因子为人肝细胞生长因子；

优选地，所述人肝细胞生长因子具有如SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列；

优选地，所述人肝细胞生长因子基因具有如GenBank数据库登录号：NC_000007.14所示的核苷酸序列；

优选地，所述突变的内含子4具有如SEQ ID NO：9所示的核苷酸序列，或者，所述片段具有选自SEQ ID NO：10和SEQ ID NO：11的核苷酸序列。