[发明专利]制备小鼠矽肺模型的改良方法

说明书

本发明公开了一种制备小鼠矽肺模型的改良方法，包括以下步骤：步骤1：对小鼠进行预处理，分离颈前肌群并暴露气管；步骤2：用无齿镊将小鼠舌头轻轻拉出口外，用20g钝针头经口咽前壁，直视下插入气管约2‑3cm；步骤3：用注射器快速注入所述气管内50μL SiO₂悬液后，移去注射器，将针头与呼吸机连接，通气10‑30s；步骤4：当小鼠正常呼吸恢复时，移除所述呼吸机，继续观察呼吸正常时，拔出针头；步骤5：缝合皮肤，并进行后期护理和观察。该方法简单易操作，较高程度的模拟了人类的染尘过程，并且具有小鼠死亡率低、模型成功率高、可操作性强的优点。

技术领域

本发明属于矽肺动物模型的制备技术领域，具体涉及一种制备小鼠矽肺模型的改良方法。

背景技术

矽肺是由于长期吸入SiO₂粉尘引起的，是以矽结节的形成和弥漫性肺间质纤维化为主要表现的常见职业病。了解矽肺的发病机制和防治措施有赖于疾病动物模型的建立。目前，建立小动物矽肺模型的方法有多种，比如：气管插管(气管造口术)滴注SiO₂悬液、经鼻腔内滴注和口咽部吸入SiO₂悬液、采用染尘系统每日雾化吸入SiO₂粉尘等方法。

上述方法虽然是现有技术常用的方法，但是都各具优缺点。其中，气管插管(气管造口术)滴注SiO₂悬液是最常用的方法，但是该方法中SiO₂悬液易于堵塞大支气管，引起动物窒息死亡以及SiO₂在两侧肺中分布不均匀，因此，导致动物模型成功率低，动物死亡率高；此外，气管造口术也会加剧动物的创伤和应激反应，影响后续实验结果。鼻腔内滴注和口咽部吸入方法最为简便易行，但有文献报道，大约50％的SiO₂会滞留于鼻腔中，进入肺内的SiO₂量明显减少，而且样本之间的SiO₂量不稳定，因此，模型成功率也较低。利用染尘系统每日雾化吸入SiO₂粉尘，此方法能够最好的模拟人类的染尘致病过程，比较符合矽肺的自然进展规律，并已成功地用于大鼠模型制备中；但是，该方法受到特殊设备条件，粉尘成本和造模时间较长等因素的限制，不能广泛得以应用。更重要的是，国内外及本发明前期研究，分别用微米级SiO₂染尘小鼠(C57BL/6小鼠染尘6个月，ICR小鼠染尘2个月)和纳米级SiO₂染尘小鼠(C57BL/6小鼠和ICR小鼠均染尘2个月)，结果表明：利用染尘系统每日雾化吸入SiO₂粉尘，不同颗粒级的SiO₂在不同品系小鼠肺内沉积都很少，不能成功制备小鼠模型。

鉴于现有技术中制备矽肺动物模型的方法中存在的各种缺陷，亟需构建一种既能降低动物死亡率，提高动物模型成功率，还能更接近人类的染尘致病过程的动物模型，以为矽肺发病机制和防治措施的研究提供优异的动物模型。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种制备小鼠矽肺模型的改良方法，该方法简单易操作，较高程度的模拟了人类的染尘过程，并且具有小鼠死亡率低、模型成功率高、可操作性强的优点。

为了实现本发明的这些目的和其它优点，提供了一种制备小鼠矽肺模型的改良方法，包括以下步骤：

步骤1：对小鼠进行预处理，分离颈前肌群并暴露气管；

步骤2：用无齿镊将小鼠舌头轻轻拉出口外，用20g钝针头经口咽前壁，直视下插入气管2-3cm；

步骤3：用注射器快速注入所述气管内50μL SiO₂悬液后，移去注射器，将针头与呼吸机连接，通气10-30s；

步骤4：当小鼠正常呼吸恢复时，移除所述呼吸机，继续观察呼吸正常时，拔出针头；

步骤5：缝合皮肤，并进行后期护理和观察。