[发明专利]一种高效樱花组培快繁的方法

权利要求书

1.一种高效樱花组培快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)无菌苗的获得：剪取健康粗壮、无病害和虫害是一年生樱花幼嫩枝条进行清洗、去叶片，将含有腋芽的枝条剪为长度3-5厘米；先使用流水清洗枝条1-2小时，后将枝条浸泡至1-2％的洗衣粉5-10分钟，再使用流水清洗枝条1-2小时；在无菌环境下对枝条进行灭菌之后用吸水纸吸干多余的水分，将枝条切成带一个腋芽的茎段即完成无菌苗获得的处理；

(2)无菌苗的诱导培养：将步骤(1)处理后带有腋芽的茎段接种于培养基中进行光培养，2周后腋芽开始萌动，形成小芽，茎段外植体萌芽率在80％以上；所述培养基成分为：MS+6-BA0.5-1.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L；

(3)无菌苗继代培养：将步骤(2)处理后夜宴萌动形成的小芽转接至增殖培养基上进行增殖继代培养，4～5周后形成丛生芽；所述增殖培养基成分为：MS+6-BA 0.5-1.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L；

(4)生根培养：先将步骤(3)处理后丛生芽切割的高度大于2cm的樱花组培苗保留3-4片展开叶，再基部叶片和叶柄切除干净，最后接种到生根培养基中；所述生根培养基为：1/2MS+IBA 0.5-1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L；

(5)炼苗与移栽：常温炼苗3～6天后，移栽入基质中培养4～5周，获得樱花的快速繁殖苗。

2.根据权利要求1所述的一种高效樱花组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，在无菌环境下进行灭菌的具体步骤为：将枝条置于无菌操作台上用70％的酒精浸泡20～30s，之后用无菌水冲洗3～5次，再用1％次氯酸钠浸泡10-15分钟，最后再使用无菌水冲洗3～5次。

3.根据权利要求1所述的一种高效樱花组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，培养基在配置后用蒸汽高压灭菌锅灭菌，且灭菌条件为在121℃下灭菌20分钟。

4.根据权利要求1所述的一种高效樱花组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，光培养的条件为：在日光灯光源光照强度为1500～2000lx的条件下每天连续光照16小时，培养温度为25±1℃。

5.根据权利要求1所述的一种高效樱花组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(2)、(3)、(4)中，采用的培养基pH值为5.6-5.8。