[发明专利]一种根瘤促生菌微杆菌属X-18及其应用

说明书

本发明公开了一种根瘤促生菌微杆菌属X‑18及其应用，属于微生物技术领域。所述根瘤促生菌的分类命名为微杆菌属(Microbacterium sp.)X‑18，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期：2019年4月8日，保藏编号CCTCC No：M2019236，保藏地址：中国武汉武汉大学。本发明的微杆菌属X‑18应用于豆科植物刺槐中，能够促进刺槐有效固氮，提供刺槐生长所需的氮素，使根瘤促生菌与植物共生固氮能力得到明显发挥，从而促进刺槐植株的生长发育，发展前景可期。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种根瘤促生菌微杆菌属(Microbacterium sp.)X-18及其应用。

背景技术

客土喷播技术是将土壤生长基质材料的混合物和植物种子均匀、高压喷播在岩土坡面上的绿化技术。该技术的生长基质材料混合物中配制有筛选好的土壤菌，主要是针对岩石等硬质边坡以及为植物能够在硬质边坡营造适宜生长环境研发的一种绿化技术。所筛选的土壤菌作为该技术生长基质材料的重要成分之一发挥着两个作用：一是能对土壤生态机制变化和环境胁迫做出反应，加速岩体的侵蚀，有效提高岩壁与喷播基质界面融合性；二是促进植物的生长发育，保证植物在胁迫环境中碳素、氮素等营养的供应。然而在实际工程中，这一技术的利用受到很多的限制，一方面是喷播基质难以长久在岩面维持，另一方面针对喷播树种能够起到促生作用的土壤微生物的发现很少。

土壤微生物在生命活动中将空气中的惰性氮素转化为植物可直接吸收的离子态氮素，保证植物的氮素营养；同时，经具有促生作用的微生物处理过的植物气孔导度升高加快植物细胞的气体交换，且胞间CO₂浓度增加，使光合作用所需的CO₂充备，进而更提高了植物的光合速率，促进植物光合作用；此外，微生物在其生命活动过程中可分解土壤中难容的矿物降解无机和有机污染物。这些都保证了植物在微环境中所需各营养成分的供应以及植物各生命活动的正常进行。明显的，有针对性的筛选特定植物的促生菌是客土喷播绿化技术能够广泛应用的关键之一。目前，国内针对不同植物，筛选适宜的根瘤促生菌株鲜有报道。

发明内容

发明目的：针对现有技术存在的问题，本发明的目的是提供一种根瘤促生菌微杆菌属X-18，为护坡植物促生菌菌库的建立提供菌种支持。本发明的另一目的是提供上述微杆菌属X-18在促进刺槐结瘤固氮中的应用。能够提供高水平的氮素，促进刺槐结瘤固氮。本发明的再一目的是提供上述微杆菌属X-18在促进刺槐生长中的应用。能有效促进地径、苗高与叶面积的增长，长势良好。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种根瘤促生菌，其分类命名为微杆菌属(Microbacterium sp.)X-18，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期：2019年4月8日，保藏编号CCTCC No：M2019236，保藏地址：中国武汉武汉大学。

微杆菌属X-18在促进刺槐结瘤固氮中的应用。

所述的应用，将微杆菌属X-18的发酵菌液稀释后直接在刺槐幼苗的根际土壤浇施。

所述的应用，包括以下步骤：

1)从斜面上取微杆菌属X-18，在营养琼脂固体培养基上，35℃活化24h；

2)将活化后的菌株用接种环挑取一环菌泥加入到LB液体培养基中，35℃，200r/min恒温震荡24h制备种子液；

3)按3％的接种量取种子液接种于液体培养基，35℃，200r/min摇床振荡培养36h，得到发酵菌液；

4)使用前，用无菌水将步骤3)得到的发酵菌液稀释后，添加到栽植好的刺槐幼苗盆栽中，60mL/盆。

步骤3)中，液体培养基为蛋白胨10g；酵母粉3g；氯化钠5g；无菌水1000mL；pH 5.6。