[发明专利]一种具有防治根肿病功能的生物有机类肥料及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有防治根肿病功能的生物有机类肥料，其特征在于：包括功能菌种发酵液和肥料载体，功能菌种发酵液的添加比例为总重量的1‰～5‰；

所述功能菌种发酵液为甲基营养型芽孢杆菌WSWFJ-29发酵后制成的菌剂，所述甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)WSWFJ-29，于2019年07月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号：CGMCC No.18269。

2.根据权利要求1所述的具有防治根肿病功能的生物有机类肥料，其特征在于：所述的肥料载体为“新云叶”生物有机肥、“禾得利”有机—无机复混肥、“云叶牌”精制有机肥、“新云叶”枯饼有机肥中的一种肥料的100份，或多种肥料各30份的混合体。

3.一种权利要求1所述的具有防治根肿病功能的生物有机类肥料的制备方法，其特征在于：包括肥料载体生产、功能菌种的添加、混合筛分步骤，具体包括

1)、肥料载体生产，选取常规肥料生产工艺进行生产，产品品质符合NY 525-2012质量标准的“新云叶”生物有机肥、“禾得利”有机—无机复混肥、“云叶牌”精制有机肥、“新云叶”枯饼有机肥中的一种或多种作为肥料载体；

2)、功能菌种的添加，将功能菌种发酵液添加到肥料载体中，混合均匀，功能菌种发酵液的添加比例为总重量的1‰～5‰；

3)、混合筛分，把步骤1的肥料载体和步骤2的功能菌种发酵液混合均匀，并进行筛分、包装即得到具有防治根肿病功能的生物有机类肥料。

4.根据权利要求3所述的具有防治根肿病功能的生物有机类肥料的制备方法，其特征在于：所述的功能菌种发酵液为甲基营养型芽孢杆菌WSWFJ-29发酵液，其有效活菌数大于2.0×10¹⁰cfu/mL。

5.根据权利要求3所述的具有防治根肿病功能的生物有机类肥料的制备方法，其特征在于：所述的功能菌种发酵液由以下步骤制备得：

A、菌种活化：选取甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)WSWFJ-29的菌株保存液，接种到菌种培养基中，在温度为35℃～38℃、转速为150～180rpm条件下活化培养24h～48h，得到菌种的活化培养液；

B、菌种纯化：采用灭菌接种环将活化培养液中的菌种接种到菌种培养基平板上，进行纯化划线培养，在温度为35℃～38℃的培养箱中培养1～3天，选取菌落特征符合功能菌种菌落特征的长势较好的单一菌落作为活化后的种子菌落；

C、种子液制备：用无菌接种环刮取一环第一步中活化的种子菌落接种到50ml菌种培养基中，在温度为35℃～38℃、转速为160rpm条件下活化培养48h～72h，得种子液；

D、发酵：按照1‰～5‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃～38℃，转速为100～140rpm/min条件下培养48h～60h，即得功能菌种发酵液。

6.根据权利要求5所述的具有防治根肿病功能的生物有机类肥料的制备方法，其特征在于：所述的A、B、C步骤中菌种培养基为牛肉膏蛋白胨液体培养基，其重量份数比为：牛肉膏2～5份、蛋白胨8～12份、氯化钠4～7份、水800～1200份，采用盐酸和氢氧化钠调节pH在6～8之间。

7.根据权利要求5所述的具有防治根肿病功能的生物有机类肥料的制备方法，其特征在于：所述的D步骤中发酵培养液的组成成分及其重量份数比为：黄豆粉2～4份、蔗糖0.5～1份、牛肉膏1～3份、玉米粉2～3份、碳酸钙0.8～1.5份、鱼粉1～2份、磷酸二氢钾0.05～0.1份、磷酸氢二钾0.05～0.1份、氯化钠1～5份、琼脂15～25份、消泡剂0.1～0.3份，采用盐酸、氢氧化钠调节pH至6.8～7.5。

8.根据权利要求3所述的具有防治根肿病功能的生物有机类肥料的制备方法，其特征在于：所述的步骤3)中筛分用的筛子目数为10～50目。

9.一种权利要求1所述的生物有机类肥料的应用，其特征在于：所述的生物有机类肥料作为基肥施用防治十字花科根肿病中的应用。