[发明专利]一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药及其制备方法在审
申请号: | 201910935135.X | 申请日: | 2019-09-29 |
公开(公告)号: | CN110622962A | 公开(公告)日: | 2019-12-31 |
发明(设计)人: | 张琪;杨发祥;尚海丽;何月秋;盘文政;王斌;赵崇钧;赵学通 | 申请(专利权)人: | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 |
主分类号: | A01N25/04 | 分类号: | A01N25/04;A01N63/02;A01N43/46;A01P3/00;C12N1/20;C12R1/07 |
代理公司: | 53211 昆明鸿昊知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人: | 陈芃綦 |
地址: | 650000 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物农药 制备 十字花科 肿病 甲基营养型 种子液制备 重量百分比 环境友好 菌种纯化 菌种活化 芽孢杆菌 发酵液 无残留 甘油 防治 氮酮 吐温 组配 发酵 无毒 安全 | ||
1.一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药,其特征在于:它包括以下重量百分比的组分:3%-10%的吐温-20、0.5%-1.0%的氮酮、10%-20%的甘油,其余为甲基营养型芽孢杆菌的发酵液;
所述甲基营养型芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.18269。
2.根据权利要求1所述的一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药,其特征在于:它包括以下步骤:它包括以下重量百分比的组分:3%的吐温-20、1.0%的氮酮、10%的甘油,其余为甲基营养型芽孢杆菌的发酵液;
所述甲基营养型芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.18269。
3.根据权利要求1所述的一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药,其特征在于:它包括以下步骤:它包括以下重量百分比的组分:10%的吐温-20、0.5%的氮酮、20%的甘油,其余为甲基营养型芽孢杆菌的发酵液;
所述甲基营养型芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.18269。
4.根据权利要求1所述的一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药,其特征在于:它包括以下步骤:它包括以下重量百分比的组分:6%的吐温-20、0.8%的氮酮、15%的甘油,其余为甲基营养型芽孢杆菌的发酵液;
所述甲基营养型芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.18269。
5.根据权利要求1所述的一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药的制备方法,其特征在于:它包括以下步骤:
步骤一,菌种活化:选取甲基营养型芽孢杆菌的菌株保存液,接种到菌种培养基中,在温度为35℃—38℃、转速为150—180rpm条件下活化培养24h—48h,得到菌种的活化培养液;
步骤二,菌种纯化:在灭菌接种环将步骤一中的活化培养液中的菌种接种到菌种培养基平板上,进行纯化划线培养,在温度为35℃—38℃的培养箱中培养1—3天,选取菌落长势较好的单一菌落作为活化后的种子菌落;
步骤三,种子液制备:用无菌接种环刮取一环第二步中活化的种子菌落接种到50ml菌种培养基中,在温度为35℃—38℃、转速为160rpm条件下活化培养48h—72h,得种子液;
步骤四,发酵:按照1‰—5‰的比例将步骤三的菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中,在温度为35℃—38℃,转速为100—140rpm/min条件下培养48h—60h,得发酵液;
步骤五,物料组配:在步骤四制得的菌剂发酵液中加入组配后物料总重量3%-10%的吐温-20、0.5%-1.0%的氮酮以及10%-20%的甘油,在常温下混合均匀,得到生物农药制剂;
步骤六,生物农药包装:将步骤五得到的生物农药制剂进行包装,即为具有防治十字花科根肿病功能的生物农药产品。
6.根据权利要求5所述的一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药的制备方法,其特征在于:所述步骤一、二、三中菌种培养基为牛肉膏蛋白胨液体培养基。
7.根据权利要求6所述的一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药的制备方法,其特征在于:所述牛肉膏蛋白胨液体培养基包括以下重量份的组分:牛肉膏2—5份、蛋白胨8—12份、氯化钠4—7份、琼脂15—25份、水800—1200份,采用盐酸和氢氧化钠调节pH在6—8之间。
8.根据权利要求6所述的一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药的制备方法,其特征在于:所述牛肉膏蛋白胨液体培养基包括以下重量份的组分:黄豆粉2—4份、蔗糖0.5—1份、牛肉膏1—3份、玉米粉2—3份、碳酸钙0.8—1.5份、鱼粉1—2份、磷酸二氢钾0.05—0.1份、磷酸氢二钾0.05—0.1份、氯化钠1—5份、消泡剂0.1—0.3份,采用盐酸、氢氧化钠调节pH至6.8—7.5。
9.根据权利要求5所述的一种具有防治十字花科根肿病功能的生物农药的制备方法,其特征在于:所述步骤四中制得的发酵液中有效活菌数大于2.0×1010cfu/mL。
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