[发明专利]用于脂肪肝及脂质代谢紊乱治疗的核酸药物及其制备方法

说明书

本发明公开了一种用于脂肪肝及脂质代谢紊乱治疗的核酸药物，包括连接有透明质酸的纳米粒以及装载在所述纳米粒上的miR‑33拮抗剂。本发明公开了一种用于脂肪肝及脂质代谢紊乱治疗的核酸药物的制备方法，包括：氨基化的纳米粒与透明质酸通过酰胺化反应，制备得到连接有透明质酸的纳米粒，得到的纳米粒对miR‑33拮抗剂进行装载，得到所述的用于脂肪肝及脂质代谢紊乱治疗的核酸药物。本发明采用共价偶联的方式将透明质酸修饰于介孔二氧化硅纳米粒表面，同时负载miR‑33拮抗剂，能够有效的避免体内大量内皮网状组织的清除，实现体内的长循环及肝靶向，更好地积聚于脂肪变的肝脏部位发挥药效。

技术领域

本发明属于药物设计技术领域，具体是涉及一种用于脂肪肝及脂质代谢紊乱治疗的核酸药物及其制备方法。

背景技术

我国脂肪肝患者已高达1.2亿，已超过病毒性肝炎，成为我国的第一大肝病。脂肪肝患者常常伴发脂质代谢紊乱，这不仅增加了动脉粥样硬化、高血压、冠心病等心脑血管疾病患病风险，而且容易导致肝纤维化、肝硬化，甚至肝衰竭和肝癌。同时，脂质代谢紊乱是肝移植术后病人的常见并发症之一，显著影响移植患者预后。

miR-33，是一种在进化上高度保守的小分子非编码RNA，分为miR-33a和miR-33b两个亚型。miR-33a由SREBP2的16号内含子编码，SREBP2主要调控细胞内的胆固醇合成和摄取；miR-33b是由SREBP1c的17号内含子区域编码，SREBP1c可选择性调控脂肪酸和甘油三脂合成。miR-33与其对应的SREBP共转录，且两者的表达成正相关，这表明miR-33能够参与到受SREBP调控的多种生理过程中。相关研究抑制内源性miR-33a和miR-33b可有效升高血清中高密度脂蛋白(HDL)并降低极低密度脂蛋白(VLDL)水平，降低心脑血管疾病的发病风险。现有的miR-33抑制剂(inhibitor)及拮抗剂(antagomir)存在着靶向性差、生物相容性差及疗效有限等多种问题。为了解决miR-33拮抗剂体内疗效有限等问题，增强miR-33拮抗剂的肝靶向性，并延长其体内的循环周期，需要对miR-33拮抗剂进行保护并采用肝靶向性的结构设计。

本专利申请的发明人徐骁教授及其团队长期致力于肝移植术后原病复发、代谢病的分子机制和防治研究，主持“肝移植原病复发的分子机制及防治研究”国家杰出青年基金、“免疫代谢稳态失衡在移植肝早期功能不全中的作用及机制研究”国家自然科学基金重点项目，“供肝LXR/SREBP/miR-33a反馈环路调控脂质代谢稳态的作用及机制研究”国家自然科学基金面上项目等多项代谢病相关国家级科研项目，提出“供肝基因调控移植术后代谢微环境并参与原病复发”的全新理念，首次揭示了供肝miR-33在肝移植术后的脂质代谢紊乱中起到了关键作用，但目前尚缺乏有效的手段来降低供肝miR-33表达水平以达到肝移植受者脂质代谢紊乱的防治，本发明首次提出装载miR-33拮抗剂的纳米药物制备方法及技术并运用于脂肪肝及脂质代谢紊乱治疗。

发明内容

本发明提供了一种装载miR-33拮抗剂的能够有效的实现对脂肪变的肝脏细胞靶向的用于脂肪肝及脂质代谢紊乱治疗的核酸药物及其制备方法。本发明将透明质酸(hyaluronic acid,HA)共价偶联于介孔(比如二氧化硅)纳米粒(mesoporous silicananoparticles，MSN)表面，并通过静电吸附装载携带负电的miR-33拮抗剂。表面修饰有透明质酸的介孔二氧化硅纳米粒能够有效的靶向CD44高表达的脂肪变肝脏细胞，同时物理吸附的miR-33拮抗剂能够避免人体内内皮网状系统的清除，延长其体内循环周期，提高对脂肪肝及脂质代谢紊乱的疗效。

一种用于脂肪肝及脂质代谢紊乱治疗的核酸药物，包括连接有透明质酸的纳米粒以及装载在所述纳米粒上的miR-33拮抗剂。

作为优选，所述纳米粒与所述miR-33拮抗剂的质量比大于20：1。进一步优选大于50:1。