[发明专利]血管性血友病因子的结构敏感多肽抗原的序列

说明书

本发明涉及一段多肽抗原序列、其在人类血管性血友病因子的空间敏感位置、及其在制备诊断和/或治疗血管性血友病因子相关的血液疾病的制剂中的应用。该多肽抗原包括SEQ ID No.1所示的氨基酸序列、生物学活性片段或其变体。该多肽的空间位置在血管性血友病因子处于活性状态时由非溶剂暴露转变为溶剂暴露，从而可被抗体识别。利用上述多肽抗原备出的识别活性状态的血管性血友病因子的抗体可以对多种血管性血友病因子相关疾病进行诊断和治疗。

技术领域

本发明涉及血管性血友病因子的识别制剂领域，尤其涉及一种血管性血友病因子的结构敏感多肽抗原的序列。

背景技术

血管性血友病因子是通过血管内皮细胞释放进血液循环中的一种很重要的大型多聚体蛋白质，它通过直接感受剪切应力来介导止血、血栓形成和血栓炎症。血管性血友病因子是最容易发生基因突变的分子之一。全球约600万人患有由于血管性血友病因子基因变异而导致的血液性血友病(VWD)—一种最广泛的遗传性出血性疾病。

血管性血友病因子多聚物的大小对血管性血友病因子的反应活性有直接影响，而多聚物的大小又对血液剪切应力十分敏感。血液剪切应力对血管性血友病因子的大小和反应性的精确调节对于止血至关重要。在低剪切条件下，由于血管性血友病因子单体之间的弱相互作用，血管性血友病因子多聚体采用松散卷曲的冷凝形状。在这些条件下，血管性血友病因子不结合血小板。在临界剪切速率以上，血管性血友病因子多聚体延伸并经历拉伸力。张力诱导A1周围的结构变化，使其与血小板结合导致血小板聚集和清除。血管性血友病因子构象的改变与它的活性有直接关联。对这种构象变化的调节失常会导致例如中风、心梗和肺栓塞等多种血栓类高风险疾病。

目前的血管性血友病因子活性诊断制剂的诊断原理以ristocetin瑞斯托霉素聚集方法为主，这些诊断制剂的均在非生理条件下使用，其诊断结果容易受到抗体和其他因素的干扰，可靠性差。目前治疗血管性血友病因子相关的血液疾病的制剂以激素为主，缺乏靶向性和持续性。

抗体药物具有高度靶向性，随着对导致疾病的分子靶向的识别和认知，近年来抗体药物出现井喷式发展，以抗PD-1/PD-L1的肿瘤单抗为代表的肿瘤抗体药物取得了很好的治疗效果。首个抗血管性血友病因子的抗体药物Caplacizumab(商品名：Cablivi)2019年2月通过FDA批准。该药物通过阻断血管性血友病因子与血小板的结合，减少了病人由于血栓而出现的脏器缺血症状，被用于治疗血栓性血小板减少性紫癜(TTP)

在凝血和血栓形成过程中，血管性血友病因子通过改变构象，由非活性状态转变成活性状态，才能结合血小板，发挥功能。Caplacizumab无区别地结合非活性和活性血管性血友病因子并导致其清除，因此导致血管性血友病因子整体水平下降。这种下降会导致无法预料的出血风险，并且随着血管性血友病因子的消耗，Caplacizumab的持久性差，而且用量较多，这些缺点使得该药物只能用于治疗血栓性血小板减少性紫癜(TTP)这样极端的小众病人。