[发明专利]一种条件性过表达CD98转基因小鼠的模型制作方法在审
| 申请号： | 201910906211.4 | 申请日： | 2019-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN110495425A | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 夏蒲 | 申请（专利权）人： | 夏蒲 |
| 主分类号： | A01K67/027 | 分类号： | A01K67/027;C12N15/12;C12N15/85;C12N15/89 |
| 代理公司： | 34139 六安市新图匠心专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 陈斌<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 065000 河北省廊坊市*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 条件性 诱导 蛋白 转基因载体构建 小鼠基因组 转基因技术 转基因小鼠 转基因载体 基因鉴定 模型小鼠 模型制作 器官肿瘤 突变模型 显微注射 组织器官 遗传性 交配 靶点 外源 小鼠 原核 品系 基因 发现 研究 | ||
1.一种条件性过表达CD98转基因小鼠的模型制作方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、CAG+LoxP+Stop+LoxP+Slc3a2转基因载体构建；
S2、转基因载体原核显微注射；
S3、品系基因鉴定，最终建立小鼠基因组中带有外源CD98基因的遗传性小鼠突变模型。
2.根据权利要求1所述的一种条件性过表达CD98转基因小鼠的模型制作方法，其特征在于，第一步的转基因载体构建方法是：将CAG+LoxP+Stop+LoxP+Slc3a2表达序列插入小鼠ROSA26位点。
3.根据权利要求1所述的一种条件性过表达CD98转基因小鼠的模型制作方法，其特征在于，第二步的转基因载体原核显微注射是：将外源线性转基因载体注射到C57BL/6小鼠受精卵细胞核内；用显微注射的方法将线性化的目的基因片段注入到小鼠受精卵的原核中，使其与小鼠基因组整合，随着细胞不断分裂，每个细胞将携带该片段；最终构建的CD98转基因小鼠能够在Cre重组酶的作用下过表达CD98蛋白。
4.根据权利要求1所述的一种条件性过表达CD98转基因小鼠的模型制作方法，其特征在于，第三步的品系基因鉴定是：将经显微注射后成活的受精卵植入假孕鼠的输卵管的壶腹部，产生F0代转基因小鼠，该小鼠基因组中整合有外源性表达序列；出生的首代CD98转基因阳性的小鼠即为首建鼠；每只首建鼠都将被视为一个独立的品系进行繁育，对每只首建鼠品系都进行剪尾基因鉴定。
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