[发明专利]一种高纯度蛋白质结晶的获取方法

说明书

本发明实施例涉及一种高纯度蛋白质结晶的获取方法，所述方法包括：制备胶体晶体多层膜；根据拟纯化的目标蛋白的晶体生长条件，配备晶体第一生长溶液和第二生长溶液；制备样品池，并在所述样品池中注入所述第一生长溶液；将制备的胶体晶体多层膜平铺在所述样品池中的所述第一生长溶液上方；将所述第二生长溶液注入所述样品池中的所述胶体晶体多层膜上方；将遮挡物覆盖在所述样品池中的所述第二生长溶液上方，以形成密闭空间；将所述样品池置于恒温条件下，所述第一生长溶液中的目标蛋白经扩散通过所述胶体晶体多层膜之间的孔隙进入所述第二生长溶液，在所述第二生长溶液中生长出高纯度蛋白质结晶。

技术领域

本发明实施例涉及分离纯化技术领域，尤其涉及一种高纯度蛋白质结晶的获取方法。

背景技术

蛋白质是生物体内含量丰富、多功能及多种类的生物大分子，是一切生命活动的物质基础。在医药、农业和食品加工业中具有潜在的应用价值。因此，了解蛋白质分子的结构并加以应用，对于医药、农业和食品加工业等领域的快速发展具有一定的推动作用。

蛋白质分子的功能特性主要取决于它独特的三维空间结构，因此，研究蛋白质分子的三维空间结构可以了解和确定它的功能。研究蛋白质的功能特性就需要对其进行富集，而蛋白质分子以晶体结构存在时是比较稳定且便于分析的，所以蛋白质结晶成为了人们重点关注的问题之一。

蛋白质结晶时主要存在两类杂质：小分子和大分子杂质。一方面，缓冲盐溶液以及沉淀剂会产生小分子杂质；另一方面，大分子杂质种类繁多，包括蛋白质的自聚体以及分离目标蛋白时混杂的其他蛋白分子等。杂质结合于蛋白质晶体中会对其生长产生显著的影响，从而对研究蛋白质的功能特性产生影响，因此如何更大程度的减少杂质获得高纯度的蛋白质晶体是当前急需解决的问题。

发明内容

鉴于此，为解决现有技术中的问题，本发明实施例提供了一种高纯度蛋白质结晶的获取方法。

第一方面，本发明实施例提供了一种高纯度蛋白质结晶的获取方法，所述方法包括：

制备胶体晶体多层膜；

根据拟纯化的目标蛋白的晶体生长条件，配备晶体第一生长溶液和第二生长溶液；

制备样品池，并在所述样品池中注入所述第一生长溶液；

将制备的胶体晶体多层膜平铺在所述样品池中的所述第一生长溶液上方；

将所述第二生长溶液注入所述样品池中的所述胶体晶体多层膜上方；

将遮挡物覆盖在所述样品池中的所述第二生长溶液上方，以形成密闭空间；

将所述样品池置于恒温条件下，所述第一生长溶液中的目标蛋白经扩散通过所述胶体晶体多层膜之间的孔隙进入所述第二生长溶液，在所述第二生长溶液中生长出高纯度蛋白质结晶。

在一个可能的实施方式中，所述制备胶体晶体多层膜，包括：

根据胶体微球直径的大小选择不同的方法将单分散胶体微球自组装成高度有序的胶体晶体多层膜。

在一个可能的实施方式中，所述胶体晶体多层膜包括两层胶体晶体膜或者三层胶体晶体膜。

在一个可能的实施方式中，所述第一生长溶液中的目标蛋白的浓度至少为相同温度条件下目标蛋白在所述第一生长溶液中溶解度的120％或以上，以形成目标蛋白的过饱和溶液。

在一个可能的实施方式中，所述第一生长溶液为包括目标蛋白、杂质以及沉淀剂的晶体生长溶液，其中溶液具有满足目标蛋白生长的酸碱度。

在一个可能的实施方式中，所述第二生长溶液为不包含目标蛋白与杂质，但包含沉淀剂的晶体生长溶液。

在一个可能的实施方式中，所述制备样品池，包括：