[发明专利]一种高纯度蛋白质结晶的获取方法在审
| 申请号： | 201910904791.3 | 申请日： | 2019-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN110606867A | 公开（公告）日： | 2019-12-24 |
| 发明（设计）人： | 戴国亮;蓝鼎;史建平 | 申请（专利权）人： | 中国科学院力学研究所 |
| 主分类号： | C07K1/30 | 分类号： | C07K1/30 |
| 代理公司： | 11390 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 席卷 |
| 地址： | 100190 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生长溶液 样品池 多层膜 胶体晶体 高纯度蛋白质 目标蛋白 制备 晶体生长条件 制备胶体晶体 遮挡物覆盖 恒温条件 密闭空间 平铺 扩散 配备 生长 | ||
1.一种高纯度蛋白质结晶的获取方法，其特征在于，所述方法包括：
制备胶体晶体多层膜；
根据拟纯化的目标蛋白的晶体生长条件，配备晶体第一生长溶液和第二生长溶液；
制备样品池，并在所述样品池中注入所述第一生长溶液；
将制备的胶体晶体多层膜平铺在所述样品池中的所述第一生长溶液上方；
将所述第二生长溶液注入所述样品池中的所述胶体晶体多层膜上方；
将遮挡物覆盖在所述样品池中的所述第二生长溶液上方，以形成密闭空间；
将所述样品池置于恒温条件下，所述第一生长溶液中的目标蛋白经扩散通过所述胶体晶体多层膜之间的孔隙进入所述第二生长溶液，在所述第二生长溶液中生长出高纯度蛋白质结晶。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述制备胶体晶体多层膜，包括：
根据胶体微球直径的大小选择不同的方法将单分散胶体微球自组装成高度有序的胶体晶体多层膜。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胶体晶体多层膜包括两层胶体晶体膜或者三层胶体晶体膜。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一生长溶液中的目标蛋白的浓度至少为相同温度条件下目标蛋白在所述第一生长溶液中溶解度的120％或以上，以形成目标蛋白的过饱和溶液。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一生长溶液为包括目标蛋白、杂质以及沉淀剂的晶体生长溶液，其中溶液具有满足目标蛋白生长的酸碱度。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二生长溶液为不含目标蛋白与杂质，但包含沉淀剂的晶体生长溶液。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述制备样品池，包括：
利用目标材质的玻璃制备样品池。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将遮挡物覆盖在所述样品池中的所述第二生长溶液上方，以形成密闭空间，包括：
将目标材质的玻璃片覆盖在所述样品池中的所述第二生长溶液上方，以形成密闭空间。
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