[发明专利]基于中空金纳米粒-DNA复合物的生物/化学检测试剂和检测方法有效
| 申请号： | 201910892191.X | 申请日： | 2019-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN110553991B | 公开（公告）日： | 2021-12-24 |
| 发明（设计）人： | 崔惠芳;王琼璘;宋小杰;吕琪妍;李宗宜 | 申请（专利权）人： | 郑州大学 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31;G01N27/48;G01N33/531;G01N33/543 |
| 代理公司： | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人： | 杨海霞 |
| 地址： | 450001 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 中空 纳米 dna 复合物 生物 化学 检测 试剂 方法 | ||
1.基于中空金纳米粒-DNA复合物的癌胚抗原检测试剂，其特征在于，通过如下方法制备而成：
（1）制备rpDNA-HGNP-HRP纳米复合物试剂
将经过还原处理的HS-rpDNA溶液加入到中空金纳米粒（HGNP）溶液中，室温混合反应；离心清洗后在沉淀中加入辣根过氧化物酶（HRP）溶液，室温混合反应；将得到的rpDNA-HGNP-HRP纳米复合物离心清洗，最后将沉淀分散在PBS缓冲溶液中备用；所述HS-rpDNA序列为：5’- HS-(CH2)6(A)12AATTG AATAA GCTGG TAT-3’；
（2）制备检测试剂
A、制备MB/cpDNA/aptamer磁珠复合物：取链霉亲和素磁珠（MB）悬浮液置于反应管中，加入生物素修饰的cpDNA溶液，室温混合反应，磁分离并用缓冲液清洗磁珠，将得到的固定cpDNA的MB记作MB/cpDNA；然后在MB/cpDNA中加入癌胚抗原的核酸适配体溶液，室温杂交反应；磁分离并用缓冲液清洗磁珠后得到MB/cpDNA/aptamer磁珠复合物；所述cpDNA序列为：5’-TCACA GATGA GT(A)12-Biotin-3’；所述癌胚抗原的核酸适配体序列为：5’-(T)6ACTCATCTGT GATTT
B、制备检测试剂：将制得的MB/cpDNA/aptamer磁珠复合物与rpDNA-HGNP-HRP纳米复合物溶液混合，室温反应，磁分离并用缓冲液清洗后得到检测试剂。
2.如权利要求1所述的基于中空金纳米粒-DNA复合物的癌胚抗原检测试剂，其特征在于，作为检测试剂套，包括组分A和组分B，组分A为MB/cpDNA/aptamer磁珠复合物，组分B为rpDNA-HGNP-HRP纳米复合物。
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