[发明专利]一种红豆杉胚胎培养育苗方法

说明书

本发明涉及一种植物繁殖方法，具体涉及一种红豆杉胚胎培养育苗方法，包括以下步骤：外植体处理，MS培养基培养，试管培养，炼苗移栽。本发明的将胚从种子中分离并进行离体培养，避免了自然环境对其萌发的影响；培养阶段采用不同培养基，培养基加入不同物质，提高了萌发率和成苗率，为红豆杉繁殖提供了快捷的方法。

技术领域

本发明涉及一种植物繁殖方法，具体涉及一种红豆杉胚胎培养育苗方法。

背景技术

红豆杉属于浅根植物，其主根不明显、侧根发达，是世界上公认濒临灭绝的天然珍稀抗癌植物，由于在自然条件下红豆杉生长速度缓慢，再生能力差，所以很长时间以来，世界范围内还没有形成大规摸的红豆杉原料林基地。

红豆杉常用的繁殖方法有两种，种子繁殖和扦插繁殖。其中种子繁殖需要需要经过一个催芽过程，常采用室外自然变湿沙藏层积处理种子以提高种子发芽率。然而自然环境很难人为控制，例如长期不下雨会导致湿度较低，遇上梅雨天气又长期降雨导致湿度较大。而红豆杉的扦插繁殖在光、温、湿等方面的要求都比较高，自然环境无法满足其繁殖要求，需投入较多人力、物力，且成活率相对种子繁殖较低。

发明内容

本发明旨在解决上述问题，提供了一种红豆杉胚胎培养育苗方法，避免了自然环境对其繁育的影响，大大提高了红豆杉的萌发率和成苗率。

按照本发明的技术方案，所述红豆杉胚胎培养育苗方法，包括以下步骤：

（1）成熟红豆杉种子去除假种皮，用线状自来水冲洗5-10min后再蒸馏水中浸泡1-2 h，再依次用70％酒精消毒1-2min，0.1% 升汞消毒20-30min，无菌水冲洗干净，在无菌滤纸上将胚剥离作为外植体；

（2）将步骤（1）所得外植体接种到MS培养基中，于24-26℃的条件下暗培养15-20天至外植体萌发；每升MS培养基中添加0.8-1.2g水解酪蛋白、0.8-1.2g酵母膏、28-32g蔗糖和6-8g琼脂；

（3）将步骤（2）所得萌发的外植体，移至光照条件下培养20-25天至芽长2cm，培养温度为24-26℃，每天光照10-12h，光照度为2000lx；

（4）将步骤（3）所得幼苗转移至试管内单独培养20-30天，试管内加入1/4-1/2的WPM培养基；每升1/4-1/2的WPM培养基中添加0.1-0.5mg 6-BA、0.05-0.1mg NAA、4-6g活性碳、0.06-0.10g维生素B1、28-32g蔗糖和6-8g琼脂；

（5）将步骤（4）所得试管植株炼苗4-7天后移栽至灭菌基质中，生长25-40天后移栽到大田。

进一步的，所述步骤（5）中的灭菌基质为蛭石基质。

本发明的有益效果在于：将胚从种子中分离并进行离体培养，避免了自然环境对其萌发的影响；培养阶段采用不同培养基，培养基加入不同物质，提高了萌发率和成苗率，为红豆杉繁殖提供了快捷的方法。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例一

一种红豆杉胚胎培养育苗方法，包括以下步骤：

（1）成熟东北红豆杉种子去除假种皮，用线状自来水冲洗5min后再蒸馏水中浸泡1 h，再依次用70％酒精消毒1min，0.1% 升汞消毒20min，无菌水冲洗干净，在无菌滤纸上将胚剥离作为外植体；

（2）将步骤（1）所得外植体接种到MS培养基中，于24℃的条件下暗培养150天至外植体萌发；每升MS培养基中添加lg水解酪蛋白、1g酵母膏、30g蔗糖和7g琼脂；