[发明专利]用于制备高密度脂蛋白胆固醇测定试纸的方法

说明书

用于测定高密度脂蛋白胆固醇的方法，包括以下操作：获得10微升体液样本，将体液样本加入上述试纸的加样区，等待反应，用荧光免疫分析仪测量试纸上的量子点线条的荧光强度，比对荧光强度‑胆固醇浓度曲线获得高密度脂蛋白胆固醇含量。本发明利用双氧水淬灭量子点的方式来检测高密度脂蛋白的含量，精度高，所需样本量少的优点。

技术领域

本发明涉及高密度脂蛋白胆固醇测定方法，具体涉及一种用于高密度脂蛋白胆固醇测定的试纸条及其制备方法。

背景技术

POCT，即时检验（point-of-care testing），指在病人旁边进行的临床检测及床边检测（bedside testing），通常不一定是临床检验师来进行。是在采样现场即刻进行分析，省去标本在实验室检验时的复杂处理程序，快速得到检验结果的一类新方法。随着人们生活水平的提高，人们的健康意识正在加强，POCT诊断设产品也越来越受到人们的青睐。由于POCT诊断产品具有体积小，操作简单，不需要操作人员有较强的专业性便可得到准确的结果，这使得人们在家庭完成检验成为可能。

胆固醇可与血清中的脱辅蛋白质配合形成脂蛋白，脂蛋白分为乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白。从流行病学上看，HDL胆固醇的水平与动脉硬化性疾病发生频率成反相关，其检测广泛用于预防或诊断缺血性心脏病。传统的用于检测HDL胆固醇的方法多首先使用离心或电泳将HDL分离，然后再进行后续操作，这些方法往往过程繁琐，需要具有专业技能的人才能完成相关操作，因此这些方法不适用于家庭使用。

目前已经有相关专利报道了可对高密度脂蛋白胆固醇快速检测的产品，例如专利（CN 1258601 C）公开了一种高密度脂蛋白（HDL）胆固醇测定用试件，方法使用两种表面活性剂实现高密度脂蛋白（HDL）与非高密度脂蛋白的分离，所述试件结构简单，检测方便快捷。专利（US 7374719 B2）通过将经不同的试剂处理的功能层固定于设计好的试纸卡壳中实现了同时对总胆固醇，高密度脂蛋白胆固醇及甘油三酯的检测，并通过计算，间接给出非高密度脂蛋白胆固醇的量，方法快捷方便，需要35 µL的样本量。

尽管上述所报道的产品均适合用于家庭快速诊断，但由于以上产品均是基于显色原理，例如专利（US 7374719 B2）通过光反射检测生成产物的颜色变化，进而得知样本中被测物的量。由于显色本身需要反应层生成较多的产物以使颜色达到一定的深度变化才能被检测，这使得这些产品进行检测时需要较高的样本量，同时，显色本身涉及到酶反应，这增加了产品涉及的酶的种类及用量。再者，酶反应受样本基质影响很大，因而上述产品面临更大的“基质效应”，从而给检测结果带来更大的不确定性。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种利用双氧水淬灭量子点的方式来检测高密度脂蛋白的检测装置。这种检测装置能够分离出体液样本中的高密度脂蛋白，使将分离出来的高密度脂蛋白进行氧化反应产生双氧水，扩散到量子点线条，发生碳量子点荧光淬灭反应，碳量子点荧光淬灭反应表征高密度脂蛋白含量，从而实现高密度脂蛋白含量测试的目的。

本发明的第一方面，在于提供一种高密度脂蛋白胆固醇测定试纸，该试纸包括分离层，反应层和检测层；分离层接受样本并将高密度脂蛋白从样本中分离，分离获得的高密度脂蛋白渗透到反应层，反应层的产物包括双氧水；双氧水渗透到检测层，检测层包括扩散部和量子点线条，双氧水先渗透到扩散部，再从扩散部扩散到量子点线条。

优选的，分离层在反应层之上，反应层在检测层之上。样本在重力的作用下逐层向下渗透。

优选的，在仰视方向，反应层完全覆盖分离层；在俯视方向上，反应层部分覆盖检测层的扩散部，量子点线条位于未被反应层覆盖的部分。反应层生成的双氧水先渗透到扩散部，再从扩散部扩散到量子点线条。使量子点线条在反应层和分离层之外，便于量子点线条直接被观测和检验。当然，量子点线条被覆盖在反应层和分离层下方也可以，只要荧光免疫分析仪能够检测到量子点线条即可。